超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法测定β-内酰胺类抗生素 - 岛津中国.pdf

超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法测定 β- 内酰胺类抗生素 摘 要：本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A 和三重四极杆质谱仪 LCMS-8040 联用快速测定β- 内酰胺类抗生素的方法。用超高效液相色谱LC-30A 分离，三重四极杆质谱仪 LCMS-8040 进行定量分析。6 种β- 内酰胺类抗生素在3 分钟内得到快速分离和检测。所有样品 在0.5 ~ 1000 µg/L 浓度范围内线性良好，标准曲线的相关系数均在0.9999 以上；对0.5 µg/L 、2 µg/L 和5 µg/L 混合标准溶液进行精密度实验，连续6 次进样保留时间和峰面积相对标准偏差分 别在0.728%和3.581% 以下，系统精密度良好。 关键词： β- 内酰胺类抗生素 超高效液相色谱仪 三重四极杆质谱仪 β- 内酰胺类抗生素（β-lactams ）是历史最悠久的抗微生物药物，同时也是最大和最重要的 一类抗生素，自 1941 年青霉素首次应用以来，至今已研制出了近百种 β- 内酰胺类抗生素。主 要用于治疗革兰氏菌，如葡萄球菌、肺炎球菌、链球菌、大肠杆菌、嗜血杆菌、沙门氏菌等引 起的各种感染。β- 内酰胺类抗生素作为兽药用量非常大，使用后会在动物体内有一定的残留， 食用含有β- 内酰胺类抗生素残留的食品后会危害人们身体健康，已有人食用牛奶后引起青霉素 过敏，而且长期使用会产生抗药性。为了避免受到食品中抗生素残留的危害，保护人民的身体 健康，各国都对各种抗生素制定了严格的最高残留限量，并且随着人们对健康问题的重视和新 的具有更高灵敏度仪器的出现，对残留限量的规定有越来越严格、取消限量、甚至不得检出的 趋势！本文使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A 和三重四极杆质谱仪LCMS-8040 联用，建立了 一种快速准确测定β- 内酰胺类抗生素的方法，供相关检测人员参考。 1．实验部分 1.1 仪器 本实验使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A 与三重四极杆质谱仪LCMS-8040 联用系统。具体配 置为LC-30AD×2 （输液泵），DGU-20A5 （在线脱气机），SIL-30AC （自动进样器），CTO-30AC （柱温箱），CBM-20A （系统控制器），LCMS-8040 （三重四极杆质谱仪），LabSolutions Ver. 5.41 （色谱工作站）。 1.2 分析条件 液相色谱条件 分析仪器：LC-30A 系统 色 谱 柱：Shimadzu Shim-pack XR-ODS III （2.0 mm I.D.×50 mm L., 1.6 μm） 流 动 相：A －0.1% 甲酸水溶液；B －乙腈 流 速：0.4 mL/min 进样体积：20 μL 柱 温：40 ℃ 洗脱方式：梯度洗脱，B 相初始浓度为40%，时间程序见表1。 57 表1 梯度洗脱时间程序 Time(min) Module Command Value 2.00 Pumps Pump B Conc. 65 2.01 Pumps Pump B Conc. 90 2.30 Pumps Pump B Conc. 90 2.31 Pumps Pump B Conc. 40 4.00 Controller Stop 质谱条件 分析仪器： LCMS-8040 脱溶剂管温度： 250 ℃ 离子源： ESI，正离子同时扫描 加热模块温度： 400 ℃ 离子源接口电压： ESI+ 4.5kV 扫描模式： 多反应监测（MRM ） 雾化气： 氮气 3.0 L/min 驻留时间： 20 ms 干燥气：