复合表面活性剂处理生物源性骨组织作为骨移植材料的生物安全性研究.pdf

270 中国医药生物技术 2009 年 8 月第 4 卷第 4 期 Chin Med Biotechnol, August 2009, Vol. 4, No. 4 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2009.04.007 ·论著· 复合表面活性剂处理生物源性骨组织作为 骨移植材料的生物安全性研究 陈磊，孙磊，江健，陶剑峰 【摘要】 性[2] 。因此作者采用表面活性剂对异种骨进行脱细 目的 应用新型的表面活性剂处理生物源性骨组织，对其进 胞处理，制备出低抗原性生物源性骨移植材料，同 行脱细胞效果及生物安全性评价，以期得到一种更安全、可 时对该材料的结构及生物安全性和表面活性剂的 靠的骨植入材料。 残留进行评价。 方法 2 种阴离子表面活性剂 ABS （十二烷基苯磺酸钠） 和 AES （脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠）以及蒸馏水以重量比 1 材料和方法 13:7 :80 的比例配制复合表面活性剂。以新鲜的牛松质骨为 1.1 材料 原料，复合表面活性剂脱脂脱细胞的两步法工艺，制备新型 新鲜牛股骨、ABS （十二烷基苯磺酸钠）、AES 生物源性骨植入材料。对其进行组织学和表面超微结构观 （脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠）、氢氧化钠购自北京 察，同时对表面活性剂处理的生物源性骨植入材料进行急性 市化学试剂公司；数控超声波清洗器（KQ-250DB 全身毒性试验、溶血试验、细胞毒性试验的生物安全性评价。 型）购自昆山市超声仪器有限公司；切骨机（HBS- 通过骨长期植入试验观察表面活性剂生物源性骨的生物相 250 型）购自沈阳厚地实业有限公司；水浴锅和分 容性和生物降解性。采用吸光度测量法界定骨材料中表面活 光光度计（UV-2401PC 型）购自 SHIMADZU；扫 性剂的残留量。 描电镜（SEM-6380LV 型) 购自日本电子；组织切 结果 复合表面活性剂生物源性骨颜色呈乳白色，无肉眼可 片机（RM-2235 型）购自 LEICA ；L-929 小鼠成 见杂质，组织学及超微结构观察可见骨陷窝内细胞结构消 纤维细胞由北京市创伤骨科研究所提供。 失，骨小管空虚，胶原纤维排列整齐。生物安全性实验表明： 新西兰大耳白兔 30 只，体重 2.0 ~ 2.5 kg ，雌 按 GB/T16886.11-1997 急性全身毒性试验合格，溶血试验 雄各半，由北京市创伤骨科研究所动物实验室提 5% ，细胞毒性试验 0 级。复合表面活性剂生物源性骨组 供，完全随机分组，依照处死取材时间分为 1 周 组、4 周组、8 周组、12 周组、26 周组和 52 周 织中表面活性剂的残留量低于 0.1 g/L 。骨长期植入实验表 明：4 周时可见骨组织周围纤维组织生成，骨小梁内有细胞 组，每组 5 只。 爬入，植入材料与宿主骨融合良好。8 周时植入材料部分被 健康小白鼠 10 只，体重 17 ~ 23 g ，由北京市 机体吸收，24 周后被机体完全吸收。 创伤骨科研究所动物实验室提供，采用完全随机的 方法分为试验组和对照 2 组，每组 5 只。 结论 复合表面活性剂处理的生物源性骨移植材料具有良 1.2 方法 好的生物相容性和生物降解性，是一种安全、可靠的骨植入 1.2.1 复合表面活性剂（ABS/AES ）的制