人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体的构建及转染研究ξ.pdf

( ) 第 35 卷　第 1 期 西北农林科技大学学报 自然科学版 . 35 . 1 V o l N o 2007 年 1 月 ( . . . ) . 2007 Jou rn a l o f N o r thw e st A F U n iver sity N at Sci E d J an 人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体 的构建及转染研究 张晶晶, 刘凤军, 彭淑英, 宋红卫, 张　涌 ( 西北农林科技大学 生物工程研究所, 陕西 杨凌 7 12 100) 　　[摘　要]　构建了携带人乳铁蛋白(L T F ) 基因、绿色荧光蛋白(GF P ) 基因的乳腺特异性表达载体(p EBL ) , 用 脂质体法转染泌乳期莎能奶山羊乳腺上皮细胞, 转染后于荧光显微镜下观察 表达情况。用 4 18 对转染细胞 GF P G 进行筛选, 获得抗性细胞克隆, 并对转染细胞进行 PCR 检测。结果显示, p EBL 构建成功, 转染 6 h 后可观察到细胞 有 GF P 表达, PCR 检测阳性克隆细胞转有L T F 基因。表明p EBL 载体已转染山羊乳腺上皮细胞, 为进一步建立转 基因动物乳腺生物反应器奠定了基础。 [ 关键词]　山羊乳腺上皮细胞; 人乳铁蛋白; 绿色荧光蛋白; 特异性载体 [ 中图分类号]　 782　　　　　　[ 文献标识码]　 [ 文章编号]　167 19387 (2007) 0 1002904 Q A C on s truc t ion a nd id e n t ific a t ion o f the m amm a ry g la nd sp e c ia l e xp re s s ion v e c to r fo r hum a n la c to fe rrit in , , , , ZHAN G J in g j in g L IU F en g jun P EN G Shu y in g SON G H on g w ei ZHAN G Yon g