水稻磷酸盐转运蛋白基因的克隆、 表达及功能分析 - science china .pdf

中国科学 C 辑 生命科学 2006, 36 (5): 385~389 385 水稻磷酸盐转运蛋白基因的克隆、 表达及功能分析* 明 凤①②**† 路 群①②† 王 伟①②† 张珊珊①② 郭 滨①② 沈大棱①② (复旦大学 ① 生命科学学院 遗传学研究所 遗传工程国家重点实验室; ② 基因多样性与设计农业中心 生物多样性与生 态工程教育部重点实验室, 上海 200433) 摘要 以水稻叶片为材料, 设计一对特异引物, 获得了编码磷酸盐转运蛋白基因 OsPT6:1. 聚 类和氨基酸保守位点分析指出该基因可能为水稻高亲和力磷酸盐转运蛋白编码基因. 原位杂交 与RT-PCR 表达结果确定此基因在根与叶片中均表达, 尤以低磷诱导下叶片的叶肉细胞表达量最 高. 同源重组表明该基因的表达可以提高毕氏酵母对磷素的吸收效率, 同时其基因的导入可以使 高亲和力磷酸盐转运蛋白缺失的酵母突变体的磷素吸收功能得以恢复. 以上结果表明, OsPT6:1 为水稻高亲和力磷酸盐转运蛋白的编码基因. 关键词 高亲和力磷酸盐转运蛋白 水稻 原位杂交 功能互补 磷素是高等植物必需的大量元素之一. 磷素缺 个能量介导的共转运过程 , 此过程由质膜上的 乏是全世界超过 25%耕作土地中农作物生长的主要 H+-ATPase调节的质子梯度来驱动 [6,7]. 在大多数植物 限制因素 [1]. 大多数土壤的饱和溶液中无机磷酸盐 中, Pi 吸收系统由低亲和力(Km值为mmol/L级)和高亲 h(P ) 的浓度范围为 0.65~2.5 μmol/L[2], 这比已报道植 和力(Km值为 1.8~1.9 μmol/L)两个部分组成 [6,8]. P 缺 i i 物从根中吸收P 的Km值 [3]要低的多. 因此, P 吸收能 乏时, 高亲和力转运系统是植物根吸收P 的主要机制. i i i 力的大小是植物生长的一个主要限制因子. 为了适 目前, 已从包括番茄 [9] 、拟南芥 [10] 、马铃薯 [11] 、苜 应土壤低磷环境, 植物在根系形态、生理生化代谢等 蓿 [12] 、