鸟苷发酵不同阶段发酵液紫外特征光谱的研究.pdf

第27 卷, 第 3 期 光　谱　实　验　室 Vol . 2 7 , No . 3 2 0 1 0 年 5 月 Chinese Journal of Sp ectroscop y Laboratory M ay , 2 0 1 0 鸟苷发酵不同阶段发酵液紫外特征光谱的研究 a 杨天佑 　贾翠英　常景玲　押辉远 ( 河南科技学院生命科技学院　河南省新乡市华兰大道东段　453003) a(洛阳师范学院生命科学系　河南省洛阳市　471002) 　研究了发酵不同阶段鸟苷发酵液的紫外吸收光谱, 结果表明, 鸟苷发酵不同阶段发酵液紫外 吸收光谱会呈现相应的特征光谱。发酵前期除了275nm 处的波峰外, 在249nm 又出现了一个新峰, 并且随 着发酵时间增加新峰逐渐升高成为主峰; 发酵中期275nm 处的波峰逐渐减弱并最后消失; 发酵后期249nm 处的波峰成为发酵液的特征波峰, 并随时间的增加逐渐上升; 发酵末期的显著特征为发酵液 的吸光值 max 基本不变。鸟苷发酵不同阶段发酵液特征光谱研究为人们认识鸟苷发酵的动态过程提供了一种新的技术 和途径, 对于鸟苷发酵生产具有一定的指导意义。 鸟苷; 发酵液; 紫外吸收; 特征光谱 : O657. 32: A : 1004-8138( 20 10) 03-0908-05 1　引言 光谱技术是现代生物化学中研究生物大分子组成结构的重要手段, 是分析物质结构高灵敏度 和高分辨率的快捷工具, 非常适于对生物大分子和细胞状态以及分子所处微环境的物理化学特性 [ 1—3] 进行研究 。紫外光谱法能够利用常规仪器设备直接检测样品, 样品不需要进行复杂的处理, 具 有设备简单、适用性广、稳定性好, 操作性强, 灵敏度高等优点, 是一种快速的分析方法, 它在分析领 域中的应用已有三十多年的历史。虽然期间各种检测方法有较大的发展, 然而紫外分光光度法仍然 [ 4] 是目前在有机化学、生物化学、药品、食品检验等各个分析领域中应用最广泛的分析方法之一 。 鸟苷发酵培养基主要包括蛋白胨、酵母膏、葡萄糖、味精、 等, 其中氮源( 蛋白胨、酵母膏 NaCl 等) 组分都含有蛋白质和核酸, 其基本组成成分中存在不饱和键, 如苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、嘌呤 和嘧啶等。由于它们都含有苯环共轭键系统, 使得发酵液在紫外区具有光吸收能力, 可以通过紫 [ 5, 6] 外分光光度仪进行检测 。本文研究了鸟苷发酵前、中、后、末不同阶段发酵液紫外吸收情况, 建立 了不同发酵阶段鸟苷发酵液的紫外吸收特征图谱, 研究有望为鸟苷发酵动态的检测提供一种新方 法。 2　实验方法 2. 1 枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis( 河南科技学院生命科技学院实验室保藏) 。 国家青年自然科学基金( 资助项目 联系人, 手机: ( 0) E-mail: yangtianyou 2004@ 163. om 作者简介: 杨天佑( 1978—) , , 河南省安阳县人, 讲师, 博士, 主要从事发酵工程研究工作。 收稿日期: 2009-09-08; 接受日期: 2009-10-10 第 3 期 杨天佑等: 鸟苷发酵不同阶段发酵液紫外特征光谱的研究 909 培养基: 斜面培养基( %) 为酵母膏0. 5, 蛋白胨0. 5, 牛肉膏0. 5, NaCl 0. 5, 琼脂2, pH 7. 2; 种子 培养基( % )