适配体技术及其在医学检验研究中的作用 - 临床检验杂志.pdf

临床检验杂志２０１２年１０月第３０卷第１０期　ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＬａｂＳｃｉ，Ｏｃｔ．２０１２，Ｖｏｌ．３０，Ｎｏ．１０ ·７６５· 文章编号：１００１７６４Ｘ（２０１２）１０７６５０４ 适配体技术及其在医学检验研究中的作用 兰小鹏（南京军区福州总医院全军临床检验医学研究所，福州３５００００） 作者简介：兰小鹏，主任技师、博士研究生导师。现任南京军区福州总医院检验科主任，兼任全国 检验学会委员、全国检验医师学会常务委员、福建省医学检验学会主任委员、全军检验专业委员会 副主任委员；《国际检验医学杂志》副主编、《中华检验医学杂志》编委、《临床检验杂志》和《现代检 验医学杂志》特邀编委；国家“８６３”计划重大项目评审专家。主要科研方向为自身免疫病实验诊 断和适配体技术，承担国家自然科学基金等十余项课题；以第一完成人获省部级成果奖四项；发表 论文１００余篇；享受军队岗位特殊津贴，荣立三等功２次。 摘要：适配体是利用指数富集配体的系统进化技术从含有大量序列的随机文库中筛选出来，能通过特定三维结构与靶标紧密 结合的单链ＤＮＡ或ＲＮＡ。适配体不仅能与各种有机物或无机物靶标分子高特异性、高亲和力结合，还具有分子量小，免疫原 性低，稳定性好，制备和标记方便等优点。适配体将有可能替代抗体，在疾病的诊断和治疗中发挥重要的作用。本文就适配 体作用和筛选的原理及策略、适配体技术在医学检验研究中的作用以及面临的挑战作简要的述评。 关键词：适配体；指数富集配体的系统进化技术；信号识别；疾病标志物 中图分类号：Ｑ５０３　　　　文献标志码：Ａ 　　适配体（ａｐｔａｍｅｒ）是利用指数富集配体的系统 相关性黄斑变性的临床治疗［６］。最近报道的结合 进化技术（ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆｌｉｇａｎｄｓｂｙｅｘｐｏｎｅｎ 了多聚纳米颗粒和适配体的药物靶向系统研究也显 ［７］ ｔｉａｌｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ，ＳＥＬＥＸ）从含有大量序列的随机文 示出适配体在疾病的诊断和治疗中的潜能 。 库中筛选出能与靶物质高特异性、高亲和力结合的 １　适配体的作用及其筛选的基本原理 配体。核酸本质的适配体起源并发展于化学领域， 它与靶标的结合类似于免疫学中的抗原抗体反应， 溶液中的单链ＤＮＡ或ＲＮＡ通常空间构象是不 为此适配体被认为是化学抗体或抗体的核酸类似 确定的，当靶目标存在时能发生适应性折叠而形成 ［１］ ［２］ 发夹（ｈａｉｒｐｉｎｌｏｏｐ）、假结（ｐｓｅｕｄｏｋｎｏｔ）、凸环（ｂｕｌｇｅ 物。自１９９０年Ｔｕｅｒｋ等 和 Ｅｌｌｉｎｇｔｏｎ等 分别筛 选了噬菌体Ｔ４ＤＮＡ聚合酶和有机染料分子的特异 ｌｏｏｐ）、Ｇ四聚体（Ｇｑｕａｄｒｕｐｌｅｘ）等特殊的热力学稳 适配体后，筛选到的适配体已超过２００种，靶标类型 定的三维空间结构，通过氢键、疏水堆积作用、范德 ［８］ 涵盖金属离子和可卡因等小分子物质及多肽、生长 华力等与靶分子紧密结合 。这一优势使适配体 ［３］ 能识别配体间如一个甲基、羟基或 ＤＶＳ对应（结 因子、毒素、病毒蛋白质、细胞、细菌、寄生虫等 。 适配体可用酶、放射性同位素、荧光物质及生物 构）体的极细微的差别。ＳＥＬＥＸ筛选过程，吸附到 素等标记以作为检测分子，它协同传统的单克隆抗 靶分子上的适配体群体，结构上较为一致，即序列的 体在流式细胞技术、生物传感器、荧光偏振、分子信 相似性，通过“对抗筛选过程”，例如调整筛选的温 标和毛细管电泳等检测技术上得到了广泛的应