葡萄糖检测试剂盒(己糖激酶比色法) - 上海源叶.pdf

上海源叶生物科技有限公司 葡萄糖检测试剂盒(己糖激酶比色法) 产品简介： 葡萄糖(Glucose, Dextrose，Glu)又称玉米葡糖，简称葡糖，化学式C6 H12O6，分子量 为 180.16，是自然界分布最广、最重要的一种单糖，属于多羟基醛。用酶学方法测定葡萄 糖是生化检测中的常用方法，最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法。上述酶学法特点是： 1、灵敏度、准确度、精密度均高；2、使用温和的反应条件；3、操作简便；4、适用于自 动分析仪。 源叶生物葡萄糖检测试剂盒(己糖激酶比色法)其检测原理是在己糖激酶的催化下，葡萄 糖和ATP 发生磷酸化反应生成葡萄糖-6-磷酸，后者与NAPD 在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化 下发生氧化还原反应，生成6-磷酸葡萄糖酸和 NAPDH，NADPD 的生成量与葡萄糖浓度 成正比，分光光度计340nm 进行比色测定。本试剂盒与门用于人或动物的血清、血浆 脑 脊液、尿液 细胞 组织等样本中葡萄糖含量定量测定，特异性高，不受尿酸和抗坏血酸的 干扰，故可以检测尿液中葡萄糖。本试剂盒仅用于科研 域，不宜用于临床诊断或其他用途。 产品组成： 试剂(A): 显色试剂 10ml 2×12.5ml -20℃ 避光 试剂(B): 酶试剂 10ml 2×12.5ml -20℃ 避光 临用前，按显色试剂 ：酶试剂=1 ：1 混匀，即 HK 工作液，4℃保存。 试剂(C): Glu 标准(5mmol/L) 1ml 1ml -20℃ 自备材料： 1、生理盐水或 PBS 2、离心管、小试管或96 孔板 3、水浴锅或恒温箱 4、分光光度计或酶标仪 5、全自动或半自动生化分析仪 操作步骤(仅供参考) ： 1 样本处理： ①血清、血浆 脑脊液、尿液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检 测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。 400-666-5481 ②细胞样本： a、取适量的细胞(一般推荐10 以上)，1000g 离心10min，弃上清，留取沉淀。 6 b、用PBS 或生理盐水清洗 1~2 次，1000g 离心10min，弃上清，留取沉淀。 c、加入200~300μl 的PBS 或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W，每 次3~5s，间隔30s，重复 3~5 次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心，待用。亦可 用 1~2% Triton X-100 冰浴 30~60min，制备好的裂解液不可离心，待用。 ③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g) ：生理盐水或 PBS(ml)=1 ：9 的比例， 入生理盐水或 PBS，冰浴条件下手动或机械匀浆。2500~3000g 离心10min，取上清待用。 2、分光光度计(1ml 比色杯)、半自动生化分析仪 Glu 测定操作: ①按下表依次加入试剂 ： 空白管(B) 对照管(C) 标准管(S) 待测管(U) 生理盐水(ml) 0.01 1.0 Glu 标准(5mmol/L)(ml) 0.01 待测样本(ml) 0.01 0.01 1.0 HK 工作液(ml) 1.0 1.0 ②充分混匀, 37℃水浴中孵育 10min。 ③分光光度计测定340nm 波长处吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。 3、普通分光光度计(2ml 比色杯)Glu 测定操作: ①按下表依次