生物制品生产中6种常用液体培养基高压灭菌前后的ph变化特征分析 .doc

生物制品生产中6种常用液体培养基高压灭菌前后的pH变化特征分析 *，沈伟，杨兴鹅，杨普珊，伍胤杰，李佳, 杨希 (中国医学科学院医学生物学研究所，昆明，650118) 摘要 目的 通过检测、分析改良马丁培养基培养基高压灭菌前后的pH变化，给实际配制培养基时预调pH的范围提供参考。方法 将培养基干粉按要求配制，用0.5 mol/L NaOH 调节成不同的pH梯度，经灭菌后用梅特勒-托利多实验室pH计(FE20)检测值，并对进行对比、分析、统计改良马丁培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、麦康凯肉汤培养基、胰酪胨大豆肉汤培养基4种培养基灭菌后pH，改良马丁培养基的幅度最大营养肉汤培养基灭菌后pH精氨酸支原体肉汤培养基不同的培养基灭菌前后的pH变化差异较大，关键词: 培养基; 高压灭菌；pH ,Yang Xi (Institute of Medical Biology, Chinese Academy of Medical Science, Kunming, 650118, China) Abstract: Objective By detecting the pH value of six media before and after autoclaving to set up a certain pH reference in media preparation. Methods We adjusted the pH value of media to 6.80-8.10 with 0.5 mol/L NaOH before autoclaving and detected pH after autoclaving with Mettler Toledo FE20–Five Easy Plus pH meter. Then we compared and analyzed the characteristics of the pH alternation. Results The pH value of four media, which were Martin Medium Modified, Thioglycollate Medium, MacConkey Broth Medium, and Tryptone Soy Broth Medium (TSB)，decreased after autoclaving. There was significant reduction in pH for Martin Medium Modified. Nutrient Broth Medium’s pH increased after autoclaving. Mycoplasma (Ma) Broth Medium Base’s pH was hardly changed. Conclusion The pH alternation of six media after autoclaving is different. This paper provided the appropriate range of pH pre-adjustment in media preparation. Keywords: media, autoclave, pH optimum range 近年来我国药害事件不断发生。其中2006年辛弗事件，调查结果是无菌检查和热原检查不符合规定[1]。[2]。而培养基的质量和灵敏度pH发生H超过最低或最高pH值时微生物就死亡[3]。pH将直接影响其灵敏度并直接关乎产品的安全性生物制品生产涉及的培养基都有特定的pH值最适范围，培养基灭菌后的pH[2]，即使用时的最适pH。水源、容器、培养基体积、灭菌器类型、高压灭菌、配制条件以及测量温度和测试方法等都有可能对[4-5]。但在这些条件都恒定的情况下，灭菌前pH的调试是影响灭菌后由于培养基灭菌后pH调试较不方便，必须在无菌条件下操作，操作繁琐且增加了污染的可能性。用于生产的培养基用量通常较大，灭菌后逐一调试pH值费时费力，因此通常是在灭菌分装前将pH预调到适当的范围，以保证高压灭菌后的培养基pH在有效范围内。高压灭菌后培养基pH会下降约0.1-0.2[4-6]。但实际工作中我们发现，不同的培养基灭菌前后的pH变化差异较大。因此，摸索培养基灭菌前后的pH变化范围对实际工作有重要的意义，可针对不同培养基设定灭菌前的pH预调范围，提高灭菌后的检测效率。本文对生物制品生产中常用的6种液体培养基(改良马丁培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、 精氨酸支原体肉汤培养基、 麦康凯肉汤培养基、营养肉汤培养基、胰酪胨大豆肉汤培养基)进行灭菌前后的pH检测，探讨不同培养基在灭菌过程中pH值变化规律，