山东省自然科学奖推荐书 - 山东大学公共卫生学院.docVIP

山东省科学技术进步奖推荐书 项目名称 黄绿青霉素致血管内皮细胞毒性机理和对动脉粥样硬化影响作用 完成人 侯海峰、李成、李玉琴、李群伟、李晓梅、袁娜、姜宝法、贾宝秀、丁国永 完成单位 泰山医学院，上海交通大学医学院附属瑞金医院北院，山东大学 推荐单位 山东卫生与计划生育委员会 项目简介 真菌毒素是由真菌产生，主要存在于粮食、动物饲料中的一大类毒性代谢产物。联合国粮食及农业组织（FAO）将真菌毒素列为最危险的谷物天然污染物。本项目组长期从事真菌毒素与人类疾病关系研究，已证明镰刀菌毒素是导致地方性大骨节病的病因（获省科技进步二等奖）。通过前期研究和查阅文献发现，在诸多真菌毒素中黄绿青霉素（citreoviridin，CIT）是与心血管损伤关系最为密切的一种， CIT可引发血管内皮的凋亡，干扰内皮细胞正常调节功能、引发炎症因子的释放，但其发生机制和致病结局尚未深入研究。由于血管内皮损伤和血管炎症性病变是动脉粥样硬化的始动因素，我们提出以下假设：CIT 毒素可通过某种机制引发血管内皮调节功能异常和内皮细胞凋亡，进而促进动脉粥样硬化的发病，并在本研究中加以阐释和验证。 在国家自然科学基金、省自然科学基金等资助下，课题组围绕CIT 对血管内皮毒性机理和致动脉粥样硬化发病的作用开展研究，运用动物实验、体外细胞培养、真菌培养、多重光谱技术、分子模拟蛋白质结合实验、动脉斑块特异染色等技术，进行了以下研究：（1） CIT 对血管内皮细胞增殖和凋亡的作用机理；（2）CIT 对人脐静脉血管内皮细胞的粘附功能的调节作用；（3）CIT 在小鼠动脉粥样硬化发病中的作用；（4）模拟CIT 与血清白蛋白、免疫球蛋白和溶菌酶等生物大分子相互作用的机理；（5）环境条件对人工培育真菌合成CIT 的影响。 得出创新性结论如下：（1）CIT 抑制了血管内皮细胞cyclinD1 表达和上调p53 和p21 表达，从而使细胞分裂周期滞留在G0/G1 期，降低细胞的增殖活性；（2）CIT 干扰凋亡调节蛋白Bax、Bcl-2 的表达，上调活化caspase-9，形成级联反应进一步活化caspase-3，引发内皮细胞凋亡；（3）CIT 通过增强TNF-α诱导的内皮细胞转录因子NF-κB 的核内易位，上调相关基因转录，导致ICAM-1, VCAM-1, E 选择素等粘附分子及趋化因子MCP-1 的表达增高，进而促进内皮细胞的粘附作用；（4）CIT 加重载脂蛋白E 基因敲除小鼠（ ApoE-/-）动脉粥样硬化斑块的形成，起到促进动脉粥样硬化发病的作用；（5）CIT 与血清白蛋白、人免疫球蛋白和溶菌酶的结合过程发生了能量转移和二级结构的变化，CIT 与血清白蛋白的作用力主要是疏水力和氢键，与人免疫球蛋白和溶菌酶的作用力主要是疏水力和静电作用，并兼有氢键；（6）环境的温度、酸碱度可影响黄绿青霉菌产毒，在变温条件下、中性或偏碱性的环境中产毒量较高，培养期为10d 的黄绿青霉菌产毒量较高。 本研究阐明了CIT 在促进动脉粥样硬化发病中的作用，揭示了CIT 对血管内皮损伤的病理机制，取得了真菌毒素致病机理研究的创新，丰富了动脉粥样硬化的病因理论，为预防以动脉粥样硬化为病理基础的心血管疾病提供了依据。 山西省疾病预防控制中心于2012 年1 月至2014 年3 月在心血管疾病的预防和控制中应用了本项目成果，临沂市疾病预防控制中心、泰安市疾病预防控制中心也应用了本成果，取得了社会效益。本研究发表论文16篇（其中SCI收录10篇）。 推广应用情况、经济效益和社会效益 1．推广应用情况（限1页） 单位：万元 应用单位名称 应用技术 应用起止时间 应用单位 联系人/电话 经济 效益 山西省疾病预防控制中心 粮食真菌的产毒特性和黄绿青霉素致动脉粥样硬化的危害 2012.1-2014.3 王三桃 临沂市疾病预防控制中心 心血管疾病发病与真菌毒素（黄绿青霉素）的关系 2012.11-2013.11 王如德 泰安市疾病预防控制中心 心血管疾病发病与真菌毒素（黄绿青霉素）的关系 2012.10-2013.10 高明广/0538-8489816 应用情况概述： 心血管疾病是严重威胁人类健康的慢性病，动脉粥样硬化是引发心血管疾病的主要病理基础。课题组基于多年来在真菌毒素致病机理研究的积累，在真菌毒素与心血管病发病关系方面展开研究，经过体外实验、动物实验和蛋白质分子结合实验，证明黄绿青霉素（CIT）是促进动脉粥样硬化发病的因素，并从血管内皮损伤的角度对其作用机制进行了阐释。本研究成果是真菌毒素致病机理研究的创新和发展，为开展心血管病的病因