2014省大学生项目申报表（龚明） - 湖南医药学院.docVIP

湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划 项　 目　 申　 报　 表 项目名称: 地龙蜂蜜浸液 曹春芽 职称 讲师 学科专业 药理学 学生曾经参与科研的情况 课题组学生参与了药学系组织的第二课堂学生课外兴趣小组，主要参与了省教育厅科研课题 “筋骨草属三种易混近缘品种活性成分的色谱分析研究”和怀化市科技局科研项目“环保霉素A对氧化应激后大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响研究醛糖还原酶在高血压心血管重塑中的作用及其与血管紧张素的关系基于CIC-3氯通道靶标的化疗耐药机制的研究SD大鼠随机分为分为5组，每组10只。即正常对照组、模型对照组、阳性对照药物组、地龙蜂蜜浸液1组、地龙蜂蜜浸液2组。每只大鼠分笼饲养，自由进食进水。正常组、模型组两组在脱毛部位用一定量的生理盐水涂擦，每天2次，其他组分别用相对应的药进行治疗，每天2次。 2.2.3检测指标 ①一般观察：每天详细观察大鼠的鼠尾颜色、活动度、皮毛颜色、精神状态、是否闭目、脓肿颜色、脓肿气味并进行记录；测量大鼠愈合时间：从开始给药第一天算起，记录各组大鼠疮面愈合的时间。 ②检测大鼠血清中的LSZ、EGF、VEGF的含量 给药14 d后,取材前禁饮食24 h，采用水合氯醛腹腔麻醉，麻醉成功后，腹部正中切口，仔细分离腹主动脉，常规腹主动脉采血，血液凝固后置于37℃温箱中30 min，然后以3000 r/min，离心15 min，取上层血清，用无菌生理盐水稀释l倍，并对应贴上标签，置于-20℃冰箱内贮存备测。用ELISA酶联免疫法按说明书操作检测LSZ、EGF、VEGF的含量。 ③制作病理组织切片并观察 在治疗或换药的第7天和14天时分别取创面的肉芽组织，用10％甲醛固定，石蜡包埋，制作芯片，HE染色后，光镜下观察其组织病理学变化。 2.3观察地龙蜂蜜浸液对氧化应激致体表溃疡小鼠模型的作用 2.3.1建立表柔比星致高氧化应激体表溃疡模型 昆明小鼠，雄性，18-20g。戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(40 mg/kg)，背部退毛2 cm*2 cm，2 g/L表柔比星皮内注射0.15 mL/只，造模后3~5 d出现溃疡，11~ 13d溃疡面积最大。 2.3.2分组处理 随机分为分为5组，每组10只。即正常对照组、模型对照组、阳性对照药物组、地龙蜂蜜浸液1组、地龙蜂蜜浸液2组。正常对照组、模型组给予生理盐水, 其余给予对应药物。 2.3.3检测指标 ①一般观察：每天详细观察大鼠的鼠尾颜色、活动度、皮毛颜色、精神状态、是否闭目、脓肿颜色、脓肿气味并进行记录；测量大鼠愈合时间：从开始给药第一天算起，记录各组大鼠疮面愈合的时间。 ②造模后27 d，每组选择溃疡疮面中等大小的6 只动物, 处死后剪取溃疡疮面及部分创周正常组织，1/2疮面组织称重，电动研磨器匀浆，生理盐水制备10 %组织匀浆液，4 ℃、3000 r/min离心10 min，取上清液分装于Ep管中，-70 ℃ 保存备用。按照SOD、MDA试剂盒说明书步骤检测组织匀浆液的SOD、MDA水平。 2.4综合评价地龙蜂蜜浸液治疗体表溃疡的作用及机制 采用SPSS19.0统计软件对数据进行分析。计量资料进行正态性、方差齐性检验，方差齐者用F检验，有统计意义者，再进行两两比较q检验；否则用非参数检验。并作出相关统计表、统计图，总结分析实验结果。 3.要解决的主要问题 ①地龙蜂蜜浸液制备； 体表溃疡动物模型的构建以及各项生化指标的检测《灵枢．痈疽》“寒气化为热，热胜则腐肉，肉腐则为脓”血管内皮生长因子（VEGF），对溃疡的愈合产生一定作用。地龙善治皮科病地龙蜂蜜浸液治疗慢性皮肤溃疡36例疗效观察 2．项目的进度安排 ①2014年月-2013年月 试验前资料收集，试验计划的制定。2014年月-2015年月制备药物，复制动物模型，完成指标测定。2015年月-201年月 数据汇总，撰写实验论文，全面总结，完成项目验收体表溃疡是一种常见病、多发病，在肉体和精神上给患者带来极大的痛苦，严重影响了患者的正常生活。中医外科学在千百年来的发展中，对体表慢性溃疡积累了极其丰富的外治经验，外治法在其治疗中起着举足轻重的作用。在教学过程中，项目组同学对体表溃疡疾病的治疗方法有浓厚的兴趣，通过讨论、查找文献，几经反复，确定立项内容。中药外用药临床应用虽广，但缺乏深层次的药理机制研究，研究方对体表溃疡的影响为中药外用制剂的研发提供又一实证支撑，扩大临床治疗药物的选择性因而具有重要的临床现实意义和学术价值。该项目选题目的明确、立论依据充分、内容具体、技术路线可行在老师的指导下，可如期完成任务。 签字：龚明 曹春芽 日期：2014.05.06 药物制备 小鼠适应性喂养一周 大鼠适应性喂养一周 表柔比星建立皮肤溃疡模型 金黄色葡萄球菌造模 阳性对照 组