一株鸽源新城疫病毒HN基因分析Analysis of HN gene from a - abc.PDF

一株鸽源新城疫病毒HN基因分析 Analysis of HN gene from a novel pigeon NDV 汇报人：王 琪 小组成员：李连峰，张晓战，董书伟 2013.12.1 项目背景 • 新城疫（newcastle disease,ND）是由新城疫病毒 （NDV）引起禽的严重的呼吸道疫病，OIE将其列 为A类疫病，危害严重。 研究背景 新城疫(Newcastle disease, ND) 急性 高度接触性 宿主谱广 研究背景 新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV) 3’ NP P M F HN L 5’ Leader 6nt 12nt 6nt Trailer ……Gene Star……Gene End.….Intergenic (1-47 nt)……Gene Star……Gene End….. 单股负链不分节段RNA病毒  副粘病毒科，禽腮腺炎病毒属 基因组全长15186/15192/15198 nt  F为毒力主要决定基因  M: 病毒形态形成  F/HN 研究背景 F/HN 囊膜蛋白 Yuan, P., et al. Structure, 2005 F HN  膜融合  受体结合  介导病毒进入细胞  NA活性  毒力因子、保护性抗原  保护性抗原 项目背景 • F基因是NDV的主要毒力决定基因，以前的 研究表明：强弱毒F蛋白裂解位点氨基酸序 列各不相同， • 强毒株序列为：112R/K-R-Q-K/R-R-F117 （在Q两侧各有一对碱性氨基酸） • 弱毒株序列为：112G/E-K/R-Q-G/E-R- L117 （以中性氨基酸取代了强毒株中的碱 性氨基酸） 科学问题 • 最近分离的一株鸽源NDV，其F基因虽然具有强毒序列特征， 但其毒力较低，且通过反向遗传手段，用标准强毒的F基 因替换后，其毒力仍然较低（Dortmans J. C，etal）。 • 科学问题：鸽源NDV毒力是否与另外一中囊膜蛋白--血 凝 素 神 经 氨 酸 酶(HN) 有关？？？ 测序及序列分析 设计针对保守区域的引物，扩增出HN CDS，分 别与强毒株和弱毒株相应序列进行比对。 弱毒（LaSota）