HOXD8基因多态性与先天性髋脱位传递不平衡分析.pdfVIP

中文摘要 目 的 ofthe dislocation l先天性髋脱位(congenital hip，CDH)是,bJD 骨科最常见的四肢畸形之一，地区与种族不同其发病率有很大差 异，一般白种人发病率高，黑种人低，而黄种人介于两者之间。高 发区如美国、意大利其发病率为9～12％o，我国报道为0．9l～3． 80％o不等，男女之比约为l：4．75，单侧多见，且左侧多于右侧。 彭明惺等通过家系调查和双生子研究发现，先天性髋脱位一 级亲属患病率明显高于一般人群，表明本病为多基因遗传病，与遗 传和环境因素密切相关。旱在80年代，国内外都曾有组织相容性 抗原HLA与先天性髋脱位相关的报道，为先天性髋脱位的遗传背 景提供了有力的佐证。目前，国外尚无有关先天性髋脱位与HOX 基因的相关报道。国内2002年曾有1篇先天性髋脱位与HOXD9 基因的报道，其结果为先天性髋脱位与HOXD9基因无明显相关 性，但由于病例数不足，其结果有假阴性的可能驴为了进一步探讨 先天性髋脱位与HOX基因的相互关系，本研究选取HOXD8基因 内二核苷酸重复序列多态性作为遗传标记，扩充先天性髋脱位核 心家系的数量，继续进行相关研究，旨在进一步证实先天性髋脱位 与HOX基因的相互关系。 {方 法 1．标本收集及基因组DNA提取：共收集先天性髋脱位核心家 系总体样本101例，其中76例可用于，II”分析。所有病例均来源 于中国医科大学第二临床学院d,AD骨外科，所有患者的临床表现、 ·1· 体检及x线检查均符合单纯型先天性髋脱位。收集101例核心 家系外周EDTA抗凝血5ml，按常规酚／氯仿法提取基因组DNA。 2．PCR扩增：选取HOXD8基因内3’端非编码区的二核苷酸 重复序列多态性作为遗传标记。反应体系251．d，循环条件：94。C 7rnin。 3．等位基因分离检测：PCR产物于含7mol／L尿素的6％变性 聚丙烯酰胺胶上作垂直电泳，恒定功率40W，电泳2．5h，银染后在 自动凝胶成像系统上成像。 4．数据处理：先天性髋脱位核心家系的传递不平衡检验 (TDT)，采用SAS软件中的FREQ程序进行分析，该软件应用核心 家系杂合子型父母未传递给子代的等位基因作为对照，计算P值， 并进行Fisher精确性检验，以检测遗传标记位点与假设的疾病位 点之间是否存在传递不平衡。 结 果 1．HOXD8基因多态性分析：在101个先天性髋脱位核心家 系中检测出16个等位基因片段，命名为等位基因l—16。 2．传递不平衡检验：对于HOXD8等位基因4而言，杂合子 型父母向子代传递等位基因4的数目为19，未传递等位基因4的 先天性髋脱位存在连锁不平衡。： 结 论 1．HOXD8基因多态性在中国人群的先天性髋脱位家系中分 ·2· 离出16个等位基因片段。 2．HOXD8基因可能与中国人群的先天性髋脱位存在相关性。 关键词：先天性髋脱位；传递不平衡检测；HOX基因 ·3· HOXD8 Transmission testof polymorphism disequilibrium gene ofthe and dislocation congenital hip Abstract