MAb225调控口腔鳞癌细胞增殖和放射敏感性的实验分析.pdfVIP

MAb225调控口腔鳞癌细胞增殖和放射敏感性的研究 缩略语表 上海第二医科大学2000届博士论文 MAb225调控口腔鳞癌细胞增殖和放射敏感性的研究 MAb225调控E1腔鳞癌细胞增殖和放射敏感性的实验研究 中文详细摘要 细胞的增殖和放射敏感性的影响并探讨其作用机理，观察MAb225对裸鼠移植 瘤的放射作用，为临床应用提供理论依据。 材料和方法：实验第一部分采用不同浓度的MAb225处理Tca8113细胞， 应用四氮唑盐还原法(MTT)分析MAb225对细胞增殖作用的影响。应用流式 细胞分析的方法分析细胞周期再分布，并应用半定量逆转录PCR和免疫组化的 K1雕表达的 方法从mRNA和蛋白两个水平探讨MAb225对细胞周期调控因子P27 影响。实验第二部分实验一应用不同浓度的MAb225处理细胞，克隆形成法绘 制细胞在不同浓度MAb225作用下的放射生存曲线，单靶多击模型分析SERoo、 sER伽和SERs 实验二首先采用了流式细胞分析的方法、双荧光染色法、电镜分析和DNA凝胶 电泳分析的方法观察不同浓度MAb225处理后Tea8113细胞放射后凋亡的变化并 行差异显著性的比较，其次应用碱性单细胞凝胶电泳的方法检测了不同MAb225 处理后细胞在放射后DNA损伤修复的变化应用，最后分析了应用MAb225处理 后细胞内GSH水平的变化。实验第三部分首先制备裸鼠的Tea8113移植瘤模型， 然后分别或联合给予MAb225和1my外照射，定时测量肿瘤的体积，绘伟0生长 曲线，观察MAb225对移植瘤的生长延缓作用和与放射协同对肿瘤的治疗作用， 抑制肿瘤血管生成的作用。 响细胞的周期再分布，加入MAb22548h，G0／G1期细胞所占比例由52％升至63 ％，S期所占比例由22％下降至10％，96h时GO船1期所占比例由54％上升至 71％，S期所占比例由23％降至4％，MAb225可以上调细胞周期调节因子P27“” ll 的表达；(3)MAb225有明显的放射增敏作用，0．5MAb225作用后的SER g／ml Do、SERt)q 上海第二医科大学2000届博士论文 2 MAb225调控口腔鳞癌细胞增殖和放射敏感性的研究 时的存活分数显著降低；(4)MAb225提高放射敏感性的机制：a流式细胞和双 u 荧光染色均发现单纯应用0．5g／ml 细胞的凋亡提高一倍左右，而联合应用可以使凋亡的比例上升至5～6倍；b单 细胞凝胶电泳分析发现MAb225处理后细胞放射后DNA损伤的修复慢于未处理 组，两者的慧尾长度在放射后的30min内均有显著性差异(PO．05)；c流式细 MAb225处理后的细胞 胞分析显示G1期细胞比例上升而s期细胞比例下降；d 其GSH水平明显低于未处理的细胞，MAb225处理后的24h起，处理组和对照 的生长，生长延缓实验发现处理组和对照组之间有显著性差异(PO．05)，MAb225 可以提高放射对裸鼠移植瘤的治疗作用，生长延缓实验分析发现联合处理组与单 瘤的血管生成，MAb225处理组的VEGF表达和微血管密度与未处理组间有显著 性差异(P0．05)。 在体外提高肿瘤细胞放射敏感性的机制可能与4个方面有关：提高肿瘤细胞的放 射后凋亡、降低s期细胞的比例、抑制细胞放射后DNA损伤的修复以及降低细 提高放射对移植瘤的治疗作用，除了体外的作用机制外MAb225在体内抑制肿 瘤的作用还与其对血管生成的抑制有关。 关键词：表皮生长因子受体 单克隆抗体MAb225鳞状细胞癌 放 射敏感性 上海第二医科大学2000届博士论文 MAb225调控口腔鳞癌细胞增殖和放射敏感性的研究 EffectofMAb225onthe