普通变形菌-中国典型培养物保藏中心.PDF

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普通变形菌-中国典型培养物保藏中心

中国典型培养物保存中心 China Center for Type Culture Collection (CCTCC) 普通变形菌 Proteusbacillus vulgaris CCTCC AB 91103 实验步骤: 1、 将实验菌种在5ml NA 液体培养基中活化,活化的菌种接种于 100ml NA 液体培养基中,37℃摇床中培养,接种后立即取0.1ml 测量OD 值,后连续22h 取菌液测其OD 值,并绘制实验菌株的生长曲线。 2、 将实验菌株细菌在NA 斜面置于37℃培养,斜面生长至12h 时,取菌进 行革兰氏染色,油镜镜检。斜面继续培养至16h 时,同样,取菌镜检。 3、 将菌种接种到生理生化检测培养基中,37℃培养 48h 。检测菌种生理生 化特性。 实验结果: 1. 生长曲线 变形杆菌 1.4 1.2 OD值 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 5 10 15 20 25 时间(h) 图1. 细菌在约10h 左右,增长速率最高。13h 左右进入对数生长后期。根据实验操作方便 取12h 和16h 两个时间点观察。 2. 显微观察 (a) (b) 图2. 对比细菌在12h 和16h 时的革兰氏染色(1000×) :(a)变形杆菌12h;(b)变形杆菌16h。 3. 鞭毛染色观察 图3. 培养16h 后,置于4℃ 3 天后用银染(A 液和B 液),仍有部分变形杆菌鞭毛明显(1000 ×) 4. 产酸实验 (37℃培养48h ) a. 葡萄糖发酵试验 图4. A 空白对照B 大肠杆菌(阳性)C 变形杆菌(阳性) b. 乳糖发酵试验 图5. A 空白对照B 大肠杆菌(阳性)C 变形杆菌(阴性) c. 蔗糖发酵试验 图6. A 空白对照B 大肠杆菌(阴性)C 变形杆菌(阴性) 教学建议: 最佳接种时间:建议前一天17:00 接种,方便第二天9:00 实验课。 最佳观察时间:实验菌株在12h、16h 时,细菌均可用于教学实验使用。 4℃保存可用于3 天内的教学实验。 普通变形菌的鞭毛染色,在培养16h 后,放入4℃ 3 天后,仍可找到部 分鞭毛明显的菌,较长菌体(单个细菌分裂后未完全分开)。 最佳保存条件:不用于实验室时,菌种可于4℃保存2 周左右。 实验教材: 沈萍,陈向东《微生物学实验》4 版. 高等教育出版社.2007, 76-80.

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