敬钊毒素-V对Kv4.3通道的抑制作用.PDFVIP

生理学报 Acta Physiologica Sinica, June 25, 2010, 62 (3): 255-260 255 研究论文 敬钊毒素 -V 对 Kv4.3 通道的抑制作用 * 蔡丽君，徐德宏，罗 吉，陈仁忠，池宇朋，曾雄智 ，王贤纯，梁宋平 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室，长沙 410081 摘 要：K+ 通道亚型Kv4.3 在调节心肌细胞动作电位的幅度与时程方面具有重要作用，是治疗心律失常的有效作用靶点， 但目前世界上该通道的特异性抑制剂非常缺乏。敬钊毒素-V (Jingzhaotoxin-V, JZTX-V)是从敬钊缨毛蜘蛛粗毒中纯化到的 一种新型肽类神经毒素，能够部分抑制大鼠背根神经节细胞上的瞬时外向K+ 电流，其半数有效抑制浓度(IC50 值)为52.3 nmol/L 。 为了研究JZTX-V 对Kv4.3 通道的作用，本实验通过多肽固相化学合成的方法得到JZTX-V ，并用双电极杆电压钳技术检测 JZTX-V 对表达在非洲爪蟾卵母细胞上的Kv4.3 通道电流的作用。结果显示，JZTX-V 能够完全抑制Kv4.3 通道电流，并 且这种抑制作用具有浓度依赖性和时间依赖性，其IC50 值为425.1 nmol/L ，JZTX-V 还能够使通道的电流- 电压关系曲线和 稳态失活曲线分别向去极化方向漂移大约29 mV 和10 mV，改变Kv4.3 通道的动力学特征，因此我们推测JZTX-V 是一种 Kv4.3 通道门控调制毒素。以上研究结果对于开发心肌Kv4.3 通道的分子探针及以Kv4.3 通道为靶点的药物设计具有借鉴作 用。 关键词：敬钊毒素- V ；K v4 . 3 通道；电压钳技术；非洲爪蟾 中图分类号：R 3 2 9 Inhibition of Jingzhaotoxin-V on Kv4.3 channel * CAI Li-Jun, XU De-Hong, LUO Ji, CHEN Ren-Zhong, CHI Yu-Peng, ZENG Xiong-Zhi , WANG Xian-Chun, LIANG Song-Ping Key Laboratory of Protein Chemistry and Developmental Biology of Ministry of Education, Hunan Normal University, Changsha 410081, China Abstact: Kv4.3 channel is present in many mammalian tissues, predominantly in the heart and central nervous system. Its currents are transient, characterized by rapid activation and inactivation. In the hearts of most mammals, it is responsible for repolarization of the action potential of ventricular myocytes and is important in the regulation of the heart rate. Because of its central role in this important physiological process, Kv4.3 channel is a promising target for anti-arrhythmic drug development. Jingzhaotoxin-V (JZTX-V) is a novel peptide neurotoxin isolated from the venom of the spider Chilobrachys jingzhao. Whole-cell patch clamp recording showed t