生物化学与分子生物学第八版蛋白质生物合成.ppt

生物化学与分子生物学;蛋白质的生物合成（翻译）;蛋白质生物合成的概念;第一节蛋白质生物合成体系;;一、mRNA是蛋白质合成的信息模板;原核生物的多顺反子;遗传密码;遗传密码表;遗传密码的特点;2. 连续性(non-punctuated);由于密码子的连续性，在开放阅读框中发生插入或缺失1个或2个碱基的基因突变，都会引起mRNA阅读框架发生移动，称为移码（frame shift），使后续的氨基酸序列大部分被改变，其编码的蛋白质彻底丧失功能，称之为移码突变。 ;3. 简并性(degeneracy);各种氨基酸的密码子数目;4. 摆动性(wobble);反密码子与密码子的识别方式与摆动配对;5. 通用性(universal);已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。;二、氨基酰-tRNA通过其反密码子与mRNA中对应的密码子互补结合 ;二级结构;三、核糖体是肽链 “装配厂”;;核蛋白体的组成; 核糖体在翻译中的功能部位 ;四、肽链生物合成需要酶类和 蛋白质因子;起始因子（initiation factor，IF） 延长因子（elongation factor，EF） 释放因子（release factor，RF）;参与原核生物翻译的各种蛋白质因子及其生物学功能;参与真核生物翻译的各种蛋白质因子及其生物学功能;第二节氨基酸与tRNA的连接 ;;反应过程;氨基酸 ＋ATP-E 氨基酰-AMP-E ＋ PPi ;第二步反应;氨基酰tRNA合成酶还有校对活性（proofreading activity），能将错误结合的氨基酸水解释放， 即将任何错误的氨基酰-AMP-E复合物或氨基酰-tRNA的酯键水解，再换上与密码子相对应的氨基酸，改正反应的任一步骤中出现的错配，保证氨基酸和tRNA结合反应的误差小于10-4。;氨基酰-tRNA的表示方法;二、肽链合成的起始需要特殊的起始氨基酰-tRNA;具有起始功能的tRNAfMet与甲硫氨酸结合后，甲硫氨酸很快被甲酰化为N-甲酰甲硫氨酸(N-formyl methionine, fMet)，于是形成N-甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAfMet)，可以在mRNA的起始密码子AUG处就位，参与形成翻译起始复合物。起始密码子只能辨认fMet-tRNAfMet。 ;fMet-tRNAfMet的生成是一碳化合物转移和利用的过程之一，反应由转甲酰基酶催化，甲酰基从N10-甲酰四氢叶酸转移到甲硫氨酸的α-氨基上。 ;第三节肽链的生物合成过程;翻译过程包括起始（initiation）、延长（elongation）和终止（termination）三个阶段。 真核生物的肽链合成过程与原核生物的肽链合成过程基本相似，只是反应更复杂、涉及的蛋白质因子更多。 ;（一）原核生物翻译起始复合物的形成 ;（a）起始复合物的装配过程；（b）rRNA识别mRNA的核糖体结合位点，保证翻译起始在起始密码子处 ;IF-3;;原核生物mRNA在核糖体小亚基上的准确定位和结合涉及两种机制;S-D序列;;IF-3;IF-3;IF-3;（二）真核生物翻译起始复合物的形成;真核生物翻译起始复合物的装配 ;翻译起始复合物形成后，核糖体从mRNA的5?端向3?端移动，依据密码子顺序，从N端开始向C端合成多肽链。 ;1. 进位(positioning)/注册(registration) 2. 成肽(peptide bond formation) 3. 转位(translocation) ;1. 进位（entrance）;2.成肽;3. 转位;真核生物肽链延长过程;肽链上每增加一个氨基酸残基，就需要经过一次进位、成肽和转位反应。如此往复，直到核糖体的A位对应到了mRNA的终止密码子上。;原核生物有3种RF RF1识别UAA或UAG，RF2识别UAA或UGA，RF3则与GTP结合并使其水解，协助RF1与RF2与核糖体结合。 真核生物仅有eRF一种释放因子， 所有3种终止密码子均可被eRF识别。 真核生物中肽链合成完成后的水解释放过程尚未完全了解。; 多聚核糖体的形成可以使蛋白质生物合成以高速度、高效率进行。;多聚核糖体;电镜下的多聚核糖体;第四节肽链生物合成后的加工和靶向输送;;;一、肽链折叠为功能构象需要分子伴侣;分子伴侣的主要作用是： ① 封闭待折叠肽链暴露的疏水区段； ② 创建一个隔离的环境，可以使肽链的折叠互不干扰； ③ 促进肽链折叠和去聚集； ④ 遇到应激刺激，使已折叠的蛋白质去折叠。 ;细胞内分子伴侣可分为两大类 一类为核糖体结合性分子伴侣，包括触发因子和新生链相关复合物； 另一类为非核糖体结合性分子伴侣，包括