药学分子生物学（吕昌莲）fuxike 2.pptVIP

一、DNA损伤类型 （一）内源性损伤 1．DNA复制错误 ?2．碱基本身存在互变异构体，形成错误的碱基配对 3. 自发的化学变化 脱嘌呤和脱嘧啶，成为无碱基位点。 ?4.氧化作用损伤碱基 （二）外源性损伤 1． 物理因素 ２．化学因素 　（1）碱基类似物　 　（2）碱基修饰剂 （亚硝酸、羟胺、烷化剂）　　　　　　　　　　 　（3）ＤＮＡ插入剂 三、 DNA损伤与抗生素菌种诱变 诱变育种提高抗生素产量 常用的诱变剂： UV、X射线和r射线等， 烷化剂 天然碱基类似物（5-FU、5-BU等） 移码突变剂（吖啶黄、吖啶橙等） 第三节、DNA修复 修复(repair)是对已发生分子改变的补偿措施，使其回复为原有的天然状态。 一、复制修复 二、损伤修复 三、复制后修复 （一）尿嘧啶糖基酶系统 一、复制修复 （三）无嘌呤（AP）修复 （二）错配修复 （一）尿嘧啶糖基酶系统 光修复酶(photolyase) UV 二、损伤修复 （一）光复活修复 ( photoreactivation repair) （二）甲基转移酶修复 （三）切除修复 这是细胞内最重要和有效的修复方式。 其过程包括去除损伤的DNA，填补空隙和连接。 主要由DNA-polⅠ和连接酶完成。 三、复制后修复 （postreplication repair) 1. 大肠杆菌的重组修复系统 2. SOS修复 (SOS repair system) 当DNA损伤广泛难以继续复制时，由此而诱发出一系列复杂的反应。 修复特异性低，对碱基的识别、选择能力差。 通过SOS修复，复制如能继续，细胞是可存活的。然而DNA保留的错误较多，导致较广泛、长期的突变。 四、限制与修饰 限制：限制性内切酶切断外来的DNA 修饰：甲基化酶保护细胞自身的DNA 五、修复系统与药物 渥曼青霉素的作用机制： 抑制DNA损伤修复的蛋白激酶的活性，DNA修复功能减弱，增加多药耐药细胞对化疗药物的敏感性。 * 目录 目录 目录 第二章 DNA的复制、损伤和修复 DNA Replication, damage and repair 生物制药教研室 吕昌莲教授 (R428) 第一节 DNA的复制 第二节 基因突变 第三节 DNA的修复系统 复制(replication) ——遗传物质的传代，以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。 （一）半保留复制 （二）双向复制 （三）半不连续复制 一、复制的一般特征 A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C C C A C T G G G G T G A C C A G G T A C T G T C C A T G A C T C C A T G A C A G G T A C T G A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C + 母链DNA 复制过程中形成的复制叉 子代DNA 半保留复制 (semi-conservative replication) DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。 （二）双向复制 5’ 5’ 3’ 3’ 真核生物 原核生物 （三）半不连续复制 (semidiscontinuous replication) 一条链上的DNA在DNA聚合酶的作用下从5’-3’方向连续合成一条长的DNA链，而另一条链上的DNA合成是不连续的，即先合成一段段短的DNA片段再将这些短片段连接成DNA长片段，称为半不连续复制。 先导链、后随链 半不连续复制 先导链、后随链 3? 5? 3? 5? 解链方向 3′ 5′ 3′ 3′ 5′ 5′ 二、DNA复制的酶学 1. 使DNA链解离的酶 （1）解旋酶 （2）单链DNA结合蛋白 （3） DNA旋转酶（拓扑异构酶Ⅱ） 解旋酶(helicase) 利用ATP供能，作用于氢键，使DNA双链解开成为两条单链。 单链DNA结合蛋白（single-strand DNA binding protein, SSB) 在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整。 DNA旋转酶 (topoisomeras