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NOS抑制剂和BDNF对庆大霉素所致离体耳蜗毛细胞 损伤的协同防护作用 硕士研究生：段廷 指导教师：赵连城教授 指导小组：付敏教授 赵萍教授 专业名称：耳鼻咽喉科学 摘 要 目的 oxide 观察一氧化氮合酶(Nitric ester，L．NAME)和 N一硝基一L一精氨酸一甲酯(Nb—nitro—L．argininemethyl 脑源性神经营养因子(Brain．derived neurotrophic 用，并初步探讨其作用机制，为药物性聋的防治提供一定的实验依据。 方法 利用耳蜗器官离体培养技术，将20只新生4．5天的Wistar 大鼠(40耳)随机分为5组，每组4只(8耳)，取耳蜗基底膜进行离 体培养24小时；而后更换培养液，在分别含有正常对照培养液(A组)， 5分钟，浸入TRITC—labeledloidin磷酸缓冲液30分钟进行荧光 phal 染色；PBS漂洗样品，甘油封固后在荧光显微镜下观察各组耳蜗毛细胞 的存活情况并摄像，图像存于电脑中，用Adobe Photoshop软件处理。 分别计数标本内、外毛细胞(IHC、OHC)的存活率，进行定量分析。 结果 正常对照组A组的耳蜗内、外毛细胞在离体培养48小时 后，其平均存活率分别为97．O％±4．0％和98．7％±2．7％；暴露于庆大霉 ——l—— 索的B组耳蜗内、外毛细胞平均存活率分别为4．3％±5．1％和4．1％± 48．7±1 胞的平均存活率分别为95．0％±2-3％和96．8％±1．1％。对各组内、外毛 细胞存活率进行统计学方差分析，B组、C组和D组均小于A组，差 异有显著性(P0．01)；C、D两组无显著性差异，但它们又明显大于B 组(P0．01)：E组与A组之间无显著性差异，但E组内、外毛细胞的 存活率又明显高于C、D两组(P0．01)。 离体大鼠耳蜗毛细胞的损伤，而二者联合应用则对暴露于GM的耳蜗 毛细胞具有较好的协同防护作用，其效果好于两者单独使用，从而为 药物性聋的临床治疗开辟了一条新路。 关键词： 耳蜗毛细胞脑源性神经营养因子 N一硝基．L．精氨酸．甲酯庆大霉素 一’一 Synergetic effectsofnitricoxide inhibitor protective synthase combinedwithbrain-derived factoron cochlear neurotrophic haircell ototoxicity againstgentamicin Su Postgraduate：Duan Director：Zhao Professor Lian—cheng Min Adviser：FuProfessor