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梗阻性肾病中肾小管周围毛细血管损伤和依那普利保护作用的实验研究 中文摘要 梗阻性肾病中肾小管周围毛细血管损伤和依那普利 保护作用的实验研究 中文摘要 伤可引起明显的肾小管上皮细胞凋亡和间质纤维化，其机制仍未完全阐明。本课题 unilateralureteralobstruction，CUUO) 通过建立大鼠单侧输尿管完全梗阻(complete 模型，来观察PTC的密度、形态学变化以及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial factor,VEGF)蛋白的表达水平，分析其相关性以及与肾小管上皮 growth 细胞凋亡和间质纤维化之间的关系；进一步应用依那普利进行干预治疗，观察其对 PTC和肾小管的保护作用。 酮麻醉下，36只大鼠用4-0丝线双重结扎左侧肾盂输尿管连接部，制成单侧输尿管 型太鼠，麻醉下收获肾脏标本后，采取断髓法处死。治疗组随机选6只CUUO模型 大鼠，从第五天开始在其饮用水中加入依那普利(200mg／L)，直至第14天收集肾脏 标本。假手术(sO)组6只大鼠仅剖腹暴露输尿管后不作结扎，术后第14天收集肾脏 标本。所有肾脏标本常规病理切片，分别用HE、PAS和Masson染色观察组织学变 化。用电镜技术研究肾小管上皮细胞和PTC的形态学变化，用Flk。1标记PTC后进 行密度测定。用TUNEL方法检测原位细胞凋亡，免疫组织化学方法检测VEGF蛋 白表达水平。用Leica图像分析系统对VEGF蛋白的表达强度和间质纤维化程度进行 半定量检测。 结果： 1．肾脏梗阻第一周，肾小管上皮细胞胞浆里的VEGF染色在局部有增强，Flk．1阳 性PTC数量变化不显著，肾小管上皮细胞凋亡和肾间质纤维化很少见。第二、 四周，VEGF表达逐渐下降，直至在一些肾小管内完全消失。与此同时，Flk．1 梗阻性肾病中肾小管周围毛细血管损伤和依那普利保护作用的实验研究 中文摘要 阳性的PTC数量减少，肾小管扩张或萎缩明显，间隙增宽； 2 电镜技术显示肾小管上皮细胞、PTC内皮细胞的死亡形式主要为凋亡；TUNEL 方法显示肾小管上皮细胞凋亡在第14天达到高峰，PTC内皮细胞的凋亡呈升高 趋势，直至实验结束； =．O．858，P0．01)之间均呈负相关； 质纤维化程度亦有明显减轻。 结论：大鼠的CUUO模型中，PTC损伤以内皮细胞凋亡和随之发生的毛细血管 结构的破坏为主要特征。PTC损伤与肾小管上皮细胞内VEGF的表达不足相关，在 肾小管上皮细胞凋亡和肾间质纤维化的过程中可能发挥重要的作用。依那普利能有 效地保护PTC、延缓梗阻性肾病进程，具有潜在治疗价值。 关键词：梗阻性肾病；单侧输尿管完全梗阻；肾小管周围毛细血管；血管内皮 细胞生长因子；胎肝激酶．1；凋亡；大鼠 作 者：樊彩斌 指导老师：周云 II 塑堕堡堕堕!堕!：鲎旦里墨塑垒笪塑堑塑堡型苎型堡兰堡旦塑壅墼里壅 墨奎塑=墨 in Peritubular and Protection Enalapril Injury Capillary Obstructive ExperimentalUropathy ABSTRACT