线粒体通透性转换孔(mPTP)的分子机理研究.pdfVIP

摘要 摘要 背景：再灌注损伤(Reperfusioninjury，RI)是急性心肌梗塞与缺血性中风 等众多心血管疾病病理损害的主要机制。在缺血后再灌注的头几分钟，细胞内 钙离子浓度升高，氧化自由基大量生成和无机磷离子浓度增加，促使线粒体内 transition 膜上形成大量非特异性的通透转换孔(Mitochondrial permeabilitypore， rIlPllP)，使线粒体内膜丧失屏障作用，大量溶质分子进入线粒体，导致线粒体 氧化磷酸化脱偶联、基质肿胀、膜电位下降和线粒体崩解，当受累的线粒体数 量与程度达到一定阈值，便会发生细胞死亡。尽管有大量关于mPTP的研究， 究竟mPTP的分子身份是什么，到目前为止还不清楚。当前研究发现同属于线 粒体溶质转运体家族(Solute CatTier， PiC)和腺嘌呤核苷酸转运体(ADP／ATP 的形成。利用序列比对结合种系发生分析，发现线粒体溶质转运体家族成员中 carriers)，推测其可能参与 CalTiers，AGC)和ATP．Mg／Pi转运体(ATP．Mg／Pi 了mPTP的形成和开放。 目的：阐明mPTP的分子身份；揭示m_PTP各成员在细胞死亡的作用。 方法：利用RT．PCR技术检测SLCs成员的表达亚型并作为研究对象，进一 步通过RNAi干扰技术对初步筛选的线粒体溶质运载体家族的PiC、ANT、AGC 扰和刺激方法检测细胞死亡数目的变化，进一步用TMRM检测线粒体膜电位的 变化。 AGC后细胞色素c的释放量同对照组相比没有明显变化。同样，RNAi干扰H9c2 高钙诱导的细胞死亡，而且H9c2细胞系模拟缺血再灌注的实验结果表明，干扰 上述SLC25A家族成员，可使线粒体膜电位保持较高水平。 摘要 放，RNAi干扰这些成员会降低细胞死亡数目。为进一步阐明mPTP的分子身份， 寻找新药靶点提供了理论基础。 关键词：线粒体通透性转换孔线粒体转运体RNA干扰细胞色素c线粒体膜 电位 ． Abstract Abstract oftheheartleadstoirreversibleof Background：Ischemia-reperfusionopening mitochondrialtransition of珈【PTPispromoted permeabilitypore(mPTP)．Opening by calcium concentrationsandadenine overload,oxidativestress，elevated phosphate nucleotide intheinnermitochondrialmembranewould depletion．mPTPopening allowfree intothemitochondriaofmolecules1．5kDa in passage resulting and the mitochondrial