细菌L-乳酸发酵的研究.pdfVIP

摘要 本文对从自然界筛选的产L．乳酸的同型乳酸发酵乳酸菌进行了N+注入、 俐高糖、高酸驯化、选育及其鉴定，对目的菌株的发酵特性、培养基、发酵条 件优化和产物的离子交换树脂分离等方面进行了研究。 l通过自然筛选，获得20株产L．乳酸的乳酸菌，通过复筛及发酵试验， 确定了一株以同型乳酸发酵产L．乳酸量相对较高的乳酸菌LB0，其L一乳酸产量 为22 Kev时，以 g／L。采用低能N+注入诱变菌株LB0，在离子注入能量为50 诱变剂量为1．2X10捧ions／s进行注入得突变株LBl，其L哥L酸产量达到了43 ∥L。 2．对突变菌株LBl进行了耐高糖、高酸驯化和选育，得到菌株LBl．1D， 该菌株分别能在乳酸浓度为24g／L和葡萄糖浓度为1509／L的平板上生长。不 产量为549／L。通过对菌株LBI、1的菌落、菌体形态特征的观察，发酵特性和 LBl，1D)。 生理生化特征的研究，确定该菌株为能动乳杆菌(Lactobacillus agilis 3．对菌株LactobacillusLBl．1D的发酵培养基进行了优化：通过单因 agms 素试验，研究了不同碳、氮源种类、生长因子、无机盐对L．乳酸产量的影响， 并在单因素试验的基础上，利用响应面分析法优化了培养基中影响L．乳酸产量 的主要因素，得到了大米糖化液(xI)、玉米浆(x2)、番茄汁(x3)对L．乳酸 JX2+0．07x 产量(y)的回归方程为：y一0．03x12．0．13x22-0．02x32+O．05xJX3+0．06x2X3+ 米浆(X2)、番茄汁(X3)的最佳浓度分别为：111．23 gm、13．9mL／L、11．8mL／L。 最终确定Lactobacillus 11．23 LBl—lD的最佳发酵培养基：葡萄糖1 agitis g／L的 MgS04‘7H20O．29，MnS04·4H20O．019，FeS04·7H20 0．们g，NaClO．019 水1000mL。 4．对菌株Lactobacillus agilisLBl—1D的培养条件进行了优化，确定了最佳 接种量为10％；最佳发酵温度为37C；最佳中和剂为NH40H；并就菌株 Lactobacillus agms LBl-1D发酵中的不同控氧方式进行了研究，结果表明，采 取先通风后准厌氧培养强于一直静止培养或一直通风状态下的培养，并确定了 当通风培养14h后转入准厌氧培养为最佳控氧时间点，采用该培养方式，发酵 液中L一乳酸产量达到103 g／L，对糖的利用率为92％。 5．对发酵产物的离子交换树脂分离进行了研究，确定了最适合分离L一乳酸 的离子交换树脂D185，其交换容量和解吸率分别为75 g／L和87％，该树脂不 吸附葡萄糖和氨基氮，最佳再生碱为NH3·H20；对树脂D185的吸附，解吸工艺 条件的研究结果表明：当pH值在9左右，吸附流速选择控制为4mL／min时． L-乳酸收率为73％：在解吸时，选择浓度为509／L氨水以2mL／min的速度进行 洗脱，得到的洗脱峰形最窄、峰值最高，L．乳酸收率为87％。 关键词：能动乳杆菌 L哥L酸 离子注入