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细胞增殖与凋亡相关因了n：大、小肝癌中的表达发其与预后关系的研究 细胞增殖与凋亡相关因子在大、小肝癌中的表达及其与预后关系的研究 硕士研究生 张雁瑞 导 师 薛玲教授 中山大学中山医学院病理教研室 摘 要 研究背景： 原发性肝癌是预后极差的肝脏上皮性恶性肿瘤。该病流行广、病程短、进 展快、病死率高。上世纪80年代末，肝癌的预后有了明显改善，主要原因是利 用血清甲胎蛋白(AFP)在肝癌高发区进行普查以及超声影像诊断技术的不断发 展使小肝癌的发现率提高，使患者赢得了宝贵的早期手术时机，小肝癌也因此受 到了人们的关注。 为何小肝癌的预后明显好于大肝癌呢?从前人的研究我们知道，小肝癌除了 肿瘤尚处于发展早期外，其包膜浸润率、血管侵犯率及远处转移率均明显低于大 肝癌，因而术后复发率降低，5年生存率显著提高。同时，有研究表明，人体肝 癌在瘤体直径近3cm时，是DNA倍体开始从二倍体向异倍体发生转变、生物学 行为从早期相对良性状态向演进期明显恶性状态转变的重要时期。这提示，小肝 癌的癌细胞从本身的基因特性到生物学行为均与中晚期肝癌细胞存在差异。 细胞增殖和凋亡是细胞生命活动的重要组成部分。作为维持机体自身稳定的 重要调节机制，增殖与凋亡不仅在胚胎发育、免疫系统克隆选择、神经系统及造 血系统发育过程中发挥重要作用，而且与肿瘤的发生、发展密切相关。 癌细胞的增殖能力是肿瘤发生、发展、浸润、转移的细胞学基础，评价肿瘤 细胞的增殖状态对于研究肿瘤的生物学行为及预后具有重要意义。Ⅺ67作为1竽 在于增殖细胞核中的一种非组蛋白性核蛋白，广泛应用于各种肿瘤增殖活性的测 定，是目前被公认为灵敏度最高的细胞增殖标记物。 近年来，人们逐渐认识到肿瘤发生不能单以细胞增生失控来解释，它还可以 由生长抑制的丧失、细胞凋亡的异常引起。正常情况下，机体维持合适的细胞数 量是通过细胞增殖和凋亡的平衡实现的。细胞增殖与凋亡的失衡在肿瘤转化中的 作用不容忽视。 细胞凋亡是一种由基因调控的细胞主动死亡过程，存在复杂的调节网络，受 细胞增殖与凋亡相关网了在人、小肝癌中的表达发其与预后关系的研究 到Fas、Bcl．2家族及凋亡抑制蛋白(LAP)家族的共同调控。 成员。在细胞膜上，Fas抗原起凋亡“按钮”作用，当活化的T细胞表面的Fas 配体(FasL)结合靶细胞表面的FaS后，即町引起级联反应诱导细胞凋亡。Fas 受体一配体系统是激发肝细胞凋亡最主要的介导途径。 Bcl一2是其家族中重要的抗凋亡成员，主要通过在线粒体上形成离子通道抑 制细胞色素c的释放来发挥抑制凋亡的功能，被称为“生存基因”。BaX是Bcl—2 家族中第一个被确定的Bcl一2同源基因。作为促凋亡成员，在接受凋亡刺激后， Bax从细胞浆移至线粒体，引起其通透性改变，使细胞色素C释放到胞浆，从而 诱导细胞凋亡。Bcl一2与Bax可形成同源或异源二聚体，在细胞凋亡调控【十『扮演 重要角色。 sun，ivin是新近发现的一种lAP家族成员，是迄今为止发现的作用最强的凋 选择性地表达于肿瘤组织而在正常成熟组织中不表达的特性使其R益成为肿瘤 基因治疗的靶点。 Ba)【蛋白及survivin蛋白和mRNA在人体大、小肝癌组织中的表达差异及与肝癌 生物学行为和预后之间的关系，以寻找影响肝癌生物学行为及预后的相关因素， 进一步探讨肝癌发生、发展的分子机制，力图为肝癌的基因治疗及转移、复发的 防治提供更多的实验依据。 目的： 小肝癌中的表达差异及与各临床病理因索之间的关系，分析影响肝癌生物学行为 及预后的相关因素，并探讨其可能的分子机制。 材料和方法： 筛选1997—2002年本教研室存档的肝癌手术标本共83例，其中大肝癌43 例，小肝癌(单肿瘤结节，瘤体直径≤3cm)40例。临床资料及随访资料完整。 II 细胞增殖与凋亡相关因子在大、小肝癌中的表达及其与预后关系的研究 的表达。 收集中山大学附属一院大肝癌手术组织标本8例，肿瘤医院小肝癌手术组织 标本3例，儿例均分别取癌与癌旁组织配对实验。采用半定量RT—PCR技术检 测survivinmRNA