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胸骨骨髓细胞变化与死亡时间关系的研究
靳俊峰硕:t论文 胸骨骨髓细胞变化与死亡时问关系的研究 中文摘要
胸骨骨髓细胞变化与死亡时间关系的研究
硕士研究生 靳俊峰
导师 陈玉川教授
中山大学基础医学院法医系法医病理教研室
中文摘要
死亡时间(postmoneminterval,PMI)又称死后问隔时间,即发现、检查尸
体时距死亡发生时的时间间隔。在法医学实践中,死亡时间的推断可以初步确定
作案时间,划定侦察范围,认定或排除嫌疑人,另外在某些财产继承、保险理赔
案件中也有一定作用。因此,死亡时间推断是法医病理学研究的重点和难点之一,
受到国内外学者的广泛关注。
目前国内外有关死亡时间的研究多集中于早期死亡时间推断,大多依据早期
尸体现象、组织学、酶组织化学、尸体化学成分变化等各项指标进行推断,但其
准确性受到许多外界因素的影响,如环境温度、湿度、衣着、体态、尸体接触物
体的导热率、死亡前体温等,以致死亡时问的推断有时会出现较大误差。而腐败
尸体残留的有价值的生物学物证较少,因此建立一耪简便易行的能够应用于腐败
尸体PMI推断的方法,在法医学工作中具有重要的理论和实际应用价值。
DNA是细胞内重要的遗传物质,其含量在同一物种的细胞内是恒定的,机
体死后发生变性降解,近年来国内外学者研究发现,死后一定时间内,组织DNA
含量随死亡时间的延长而减少,对死亡时间推断有重要意义。
骨髓存在于骨髓腔内,是一种海绵样胶状的组织,其细胞成分主要为造血细
胞、脂肪细胞等,骨髓组织受外层坚固的骨皮质包绕,处于相对密闭的环境,受
外界条件变化的影响较小,腐败过程亦较为缓慢,可望成为腐败尸体死亡时间推
断的理想检材,本试验选择胸骨标本作为研究对象,着重探讨下列问题:
靳俊峰硕}?论文 胸骨骨髓细胞变化』j死亡时间关系的研究 中文摘要
(1)观察胸骨骨髓细胞中DNA含量的变化,推断其与腐败尸体死亡时间
之问的关系。
(2)观察胸骨骨髓脂肪细胞中脂质含量的变化,探讨其与腐败尸体死亡
时间有无关系。
材料与方法
收集20一40岁之间因暴力死亡的不同个体共50例,其中男性30例,女性
20例,按年龄、性别不同随机分为一个对照组和九个实验组,每组5例。对照
组为新鲜尸体取材后立即放入lO%福尔马林液固定,实验组胸骨置于32℃培养
箱内,分别放置l一9d,然后取胸骨柄段常规10%福尔马林液固定48h,经lo%
硝酸脱钙,部分标本常规脱水,石蜡包埋,切片,分别进行HE和改良的Feulgen
法染色,部分标本行冰冻切片,苏丹Ill染色显示脂质,对染色结果作形态学观察
和计算机图像分析,所得数据输入MicrosoftExcel数据库,应用美国社会科学统
计软件包(statisticsofsocial
packagc science,SPSS)对数据进行统计学处理。
结果
一、HE染色
(1)对照组:胸骨骨髓细胞排列密集,主要由不同发育阶段的血细胞及脂
肪细胞组成,发育中的血细胞胞核呈深蓝色,多圆形、椭圆形,细胞形态规则,
边界清晰,脂肪细胞呈空泡状,大小不等,圆形或椭圆形成群分布,其间可见少
数散在的骨小梁结构,
(2)实验组:骨髓细胞初始形态无明显变化,随时间的延长细胞轮廓逐渐
变模糊,细胞问界线不明显,部分细胞核溶解,残存的细胞核着色加深,直至完
全溶解消失,脂肪细胞边界不清,偶见脂肪细胞胞质融合成巨大的空泡状结构,
至实验结束时可见残留的结缔组织及少数散在的骨小粱结构。
¨
靳俊峰硕士论文 胸骨骨髓细胞变化与死亡时问关系的研究 中文摘要
二、改良Feulgen染色:
(1)对照组:胸骨骨髓细胞核呈深紫红色,着色较深,多圆形或椭圆形,
排列密集,大小较为一致,轮廓清晰,结构完整。
(2)实验组:随时间的推移,胸骨骨髓细胞核染色由深紫红色变浅淡,轮
廓
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