肝复康胶囊的研究及对人肝癌细胞系HepG2影响.pdf

摘要 摘要 肝复康胶囊系根据肝复康丸经剂型改革(改变提取工艺及剂型)而成的中 药胶囊剂。肝复康丸系部颁标准中药成方制剂第7册收载的中药成方制剂，由 五味子、太子参、白花蛇舌草三味中药组成。功能为收敛，益气，解毒，降谷 丙转氨酶，是治疗肝炎的有效中成药，市场反应良好，用于急、慢性肝炎，早 期肝硬化和肝功能不良。但原剂型存在以下不足之处：1、制备工艺落后：由于 原剂型为丸剂，药材直接粉碎制成丸剂，其制备工艺非常落后：2、质量控制标 准落后：原丸剂质量标准中仅有两个试管反应：3、服用剂量大：由于原丸剂为 药材直接粉碎制丸，制剂中含有大量的非药用成分，因而服用剂量大，一次5--,99， 患者较难接受。拟将处方中药材经提取后制成胶囊剂，可显著减少非药用成分 的摄入，方便患者服用，为临床提供一种治疗肝炎、肝癌且服用方便的中药新 药。另外，本研究还从分子细胞生物学、免疫细胞化学探讨了肝复康胶囊抗癌 或阻断肝细胞癌变的可能途径，初步阐明了肝复康胶囊治疗肝炎和抗癌的作用 机理。主要研究内容和结果如下： 1、提取工艺研究：采用正交试验，以总木脂素的转移率考察醇提工艺，以 正丁醇提取物和总皂苷为指标考察煎煮工艺，实验结果表明五味子以5倍量70％ 乙醇回流提取2次、每次2h为优，太子参和白花蛇舌草以8倍量水煎煮3次、 每次2h为优。 2、成型工艺研究：以颗粒的流动性、吸湿性、堆密度和崩解时限为指标， 考察制剂的处方优劣。得出肝复康胶囊的成型工艺，即取干浸膏，加入20％的淀 粉、15％微粉硅胶和5％羧甲淀粉钠，混匀，以80％乙醇制粒，干燥，整粒，填充 胶囊。 3、肝复康胶囊质量标准研究：新剂型质量标准研究中对处方中三味药材均 建立了薄层定性鉴别，同时采用HPLC建立了制剂中五味子醇甲的含量测定方法； 该质量标准能更有效控制产品质量，提高了该产品的质量可控性。 4、肝复康胶囊稳定性研究：通过连续6个月的恒温恒湿加速试验 结果其外观性状、鉴别、胶囊重差异、崩解时限及含量测定等结果均符合本品 质量标准，卫生学检查也符合规定，说明肝复康胶囊在稳定性试验期问基本稳 搁要 定，因此，有效期暂定为24个月。 5、中药肝复康胶囊对人肝癌细胞系HeDG2的影响：采用MTT比色法测定 肝复康胶囊对人肝癌细胞系HepG2细胞增生的影响。用流式细胞仪分析细胞 周期、细胞凋亡，观察肝癌细胞的DNA相对含量，分析各时期细胞周期的变化。 的表达。结果表明肝复康胶囊具有较好的抑制HepG2细胞增生的作用，呈现出 时间一剂量依赖性：应用肝复康胶囊后HepG2细胞G2期比例升高，G1期和S 期细胞比例降低，并使细胞凋亡率增加。 关键词：肝复康胶囊；制剂工艺：质量标准：稳定性：流式细胞术；细胞周期； 细胞凋亡 Abstract ABSTRACT iSakindofChinese GanfukangCapsule medicine made capsules Ganfukang pill toitformulations theextraction according reform(change and processdosage istheminiSterial standardsofChinese forms)．Ganfukangpills medicine prescription 7 traditional prepa