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万寿菊灰霉病室内药剂筛选试验摘要：采用菌落直径法进行抑菌实验，研究了万霉净和世高两种药物的不同浓度对万寿菊灰霉病病原菌菌落生长的影响。结果表明：世高的浓度为10-3对万寿菊灰霉病抑菌防治有显著效果。 关键词：万寿菊；化学防治；抑菌作用；浓度 中图分类号：S682.1+1 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2011）-03-0101-1 1 材料与方法 1.1 材料 实验所用万寿菊（Tagetespatula）采摘于吉林延吉市三道湾镇农业技术推广站实验用地的万寿菊栽植地。 1.2 材料处理 从植物受害部位的边缘取样分离。以看到霉层为好的选择材料。选取病健交界的分离材料，用小剪刀剪成4-5mm的小块，用70%的酒精处理2-3s，用0.1%的升汞处理3-5min，用无菌水处理3次。 1.3 培养基 马铃薯培养基(PDA)：马铃薯200g，蔗糖20g，琼脂20g，加蒸馏水定容剂1000ml。 1.4 供试化学药剂 杀毒矾（先正达投资有限公司）64%可湿性粉剂（通用名代森锰锌），400-500倍；美派安（江苏龙灯化学有限公司）50%可湿性粉剂，500-600倍；世高（瑞士先正达作物保护有限公司10%可分散性粉剂（通用名苯醚甲环唑），1000-1500倍；万霉净（河北省衡水市民左农化有限公司）50%福甲可湿性粉剂，1000-1500倍。 2 实验方法 在进行本实验前，从同组同学所做的不同药剂对万寿菊灰霉病抑菌防治实验中得到结论，万霉净和世高对万寿菊灰霉病抑菌防治有显著效果。因此本实验针对这两种药剂的不同浓度来开展。 将灭菌好的材料在无菌条件下接到PDA平板上，倒置于26℃的培养箱中培养2-3d。 菌源是由万寿菊花分离纯化经二次转管获得。 将万寿菊灰霉病菌接种于PDA平板中，在26℃培养箱中生长4d。 取50%的万霉净， 10%的世高药剂各1g分别放入1000倍的无菌水中，分别得到浓度为10-3的溶液。然后分别从10-3的溶液中取出1m；l放入灭菌好的试管中，用移液管在无菌水中取9ml放入，将其混匀计得浓度为10-4，在10-4中在取1ml放入灭菌的试管中，用移液管在无菌水中取9ml将其混匀计得浓度为10-5。 将灰霉菌制成孢子悬浮液，取适量的悬浮液倒入平板，将已经化好的培养基待温度适宜时倒入，使其两者充分的混合在一起，用打孔器在滤纸上分别打孔，把滤纸沾药在无菌的条件下放入已经混合好的培养基中，使其抑制孢子的生长，配置了三个浓度，每个浓度都有三次重复。对照不放沾药的试纸，来做出比较。放在26-27℃的培养箱里培养。要定时的观察菌丝的生长进度。 用直径为0.4cm的打孔器在无菌滤纸上打孔，然后滤纸蘸取不同浓度药剂处理的培养基平板中央，倒置于26℃培养箱中培养。定期观察，记录抑菌菌落直径，以培养5d的抑菌菌落直径计算菌丝生长抑制率，作完全随机设计的方差分析。 3 结果与分析 以培养5d后的抑菌菌落直径进行显著性测验，表明药剂处理内的变异大于药剂间变异显著。 表1 两种药剂的各浓度对灰霉病病菌菌落生长的影响　　 　　 从表3可以看出世高10-3 与10-5，10-4与10-5之间差异极显，10-4与10-3之间差异显著，所以世高10-3的抑菌效果最好。从表2可知万霉净各浓度之间差异不显著，抑菌效果都不太好。 实验中滤纸周围平均直径越大说明抑菌效果越好，可知世高对灰霉菌的抑制效果因浓度不同而效果也不同（10-310-410-5）。 4 讨论 灰霉病是万寿菊上的一种主要病害，为害根、叶、茎、花。尤其春季气温不高，阴雨多湿，棚内湿度大，结露时间长，放风不及时，发病普遍，为害严重。在本实验中分别用世高和万霉净对万寿菊灰霉病进行了防治，世高的效果要好于万霉净，可能是因为世高可以通过输导组织传送到植物全身，具有保护和治疗双重效果，内吸渗透性好，持效期长，耐雨性好，对作物安全。万霉净对万寿菊灰霉病的抑制效果不是很明显的，可能是因为浓度太小，或者是实验中所用万霉净因时间过长而失效。在本实验中，可能由于时间和操作等因素受到一定的限制，与预想结果有一定差距，需要进一步进行探究。 参考文献 [1] 赵春哲等.万寿菊灰霉病的发生与防治.现代农业,2009 (6). [2] 高郁芳等.药用植物病理学.吉林人民出版社,2008(02). [3] 吴文君等.我国植物源害虫控制剂的研究与开发.农药, 1995.34(2):6-8. 作者简介：江义峰（1982-），男，吉林延吉人，延吉市三道湾镇农业技术推广站助理工程师，研究方向：中药材栽培；牛晶晶（1981-），女