人参皂甙单体Rb1和Rg1对小鼠睾丸支持细胞影响比较.pdfVIP

人参皂甙单体Rbl和Rgl对小鼠睾丸支持细胞影响的比较 摘要 人参，又有”百草之王”之称，在中围乃至f廿界，人参是应用历史最悠久、临 床价值最高的中草药之一。人参皂甙单体Rbl(ginsenosideRbl，GRbl)和Rgl (ginsenosideR91，GR91)是人参皂甙的主要有效成分，它们具有多种功效，对 于人体的多种器官、组织及细胞都具有重要的调控作用。本论文以原代培养的 cell)的药理作用， 支持细胞为模型，比较了GRbl和GR91对支持细胞(serl01i 为进一步研究它们药理作用机制提供理论基础。 采用两步酶消化法分离出生后3～7天的IcR小鼠睾丸支持细胞，用多次贴 壁和多次离心法纯化支持细胞，用中间纤维波形蛋白(vimentin)多克隆抗体和 ∞平滑肌肌动蛋白(∞actin)抗体进行免疫细胞化学实验，检测到所分离的支持 细胞纯度达到95％士1．2％。 首先利用细胞培养技术研究GRbl和GR91分别对支持细胞增殖的影响。 利用MTT比色法检测其对细胞生长活力的影响，用s期Brdu标记法检测支持 细胞的增殖。结果表明GRbl能促进支持细胞的存活和增殖，浓度为20腭／m】 的GRbl对支持细胞的增殖最显著；而GR91对支持细胞的活力无明显影响。 然后研究GRbl和GR91分别对支持细胞GDNF表达的影响。用不同浓度 分析，结果都表明GRbl能刺激支持细胞内GDNFmRNA的表达，即GRbl促 进了支持细胞对GDNF的分泌，但GRbl浓度刈支持细胞GDNF表达的影响不 明显；而GR91支持细胞内GDNF的表达影响不显著。 cell Iine—derived 胶质细胞源性神经营养因子(glial neurotrphicfactoLGDNF) 是转化生长因子口(1ransfoming粤owthfaclorbeta，TGF—p)超家族的一个亚族， 它的受体自GFRdl，c—Ret和NCAM，通过盯PcR检测和免疫细胞化学分析， 结果发现GDNF对支持细胞作用的信号通路是GDNF—GFRdl／NcAM。 通过本研究发现GR91列支持细胞的增值及GDNF的表达都无明显影响， GRbl能促进支持细胞的增殖，而且它能明显刺激支持细胞中GDNF分泌的增 山东帅范人学倾十论x 多，表明了GRbl促进支持细胞增殖的药理作用之一是通过GDNF— GFRal／NcAM信号通路来实现的。 本研究首次利用原代培养的小鼠睾丸的支持细胞为模型，观察了GRbl和 GR91对支持细胞影响的药理作用，为进一步研究GRbl和GR91的药理作用的 不同的分子机制及治疗男性不育症提供理论依据。 细胞增殖； GDNF 关键词：人参皂甙Rbl；人参皂甙R91；支持细胞； 中图分类号：0946 山东师范大学坝：I。论文 oftheEf-fectofGinsenosideRb1 andGinsenoside1 Comparison Rg onmeCulturedImmature SertoliCells Abstract isoneofthemosI Chjnesetraditional Ginseng important medicines，which for hasbeen usedthousandsof comainsalotof widely years．n