GB/T 16285-1996食品中葡萄糖的测定方法　酶-比色法和酶-电极法.pdf

GB/T16285-1996 前 言 食品中葡萄糖的测定方法，一般采用 《国际食搪分析方法统一委员会》规定的兰“一埃农法”(Lane andEynonsmethod)和姆“松一华尔格法”(MunsonandWalkersmethod)，即菲林氏溶液氧化还原滴定 法。此法虽沿用已久，但测定结果只是近似值。因使用菲林氏溶液滴定葡萄糖(还原搪)时，其他具有还 原能力的单搪会干扰测定结果。本标准采用的酶一比色法和酶一电极法是在检索了近20年107篇国外文 献的基础上，经过反复实验、验证而制定的。酶一比色法和酶一电极法使用的葡萄糖氧化酶(GOD)具有专 一性，只能催化葡萄糖水溶液中的3(-D-葡萄糖起反应(被氧化)，因此测定结果是真实值。 本标准的酶一比色法为仲裁法;酶一电极法为快速法。 本标准的附录A,附录B都是标准的附录。 本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准起草单位:中国农垦北方食品监测中心(酶一比色法);山东省科学院生物研究所(酶一电极 法)。 本标准经全A[食品工业标准化技术委员会秘书处审核。 本标准主要起草人:张宗城、刘宁、冯德荣、孙士青、宋家华、郝煌。 中华人民共和国国家标准 食品中葡萄糖的测定方法 GB/T16285-1996 酶一比色法和酶一电极法 Methodfordeterminationof口ucose加food -Enzyme-colorimetr阮.dh目andenzyme-electrodemethod ， 范围 本标准规定了用酶一比色法和酶一电极法测定食品中葡萄搪的方法。 本标准适用于各类食品中葡萄糖的测定;亦适用于食品中其他组分转化为葡萄糖的测定。 本标准酶一比色法的最低检出限量为。.01pg(葡萄糖/mL(试液);酶一电极法的最低检出限量为 1.0mg/100mL, 2酶一比色法 2.1 原理 葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下，催化 卜D-葡萄糖(葡萄搪水溶液状态)氧化，生成D-葡萄糖酸 -a一内醋和过氧化氢。受过氧化物酶(POD)催化，过氧化氢与4-氨基安替比林和苯酚生成红色醒亚胺。在 波长505nm处测定酿亚胺的吸光度，计算食品中葡萄糖的含量 Cc。HH,I,:O0,。++002:-i塑C,H,,O.+HZO2 HH,:O0z:++Cc6，HH,。O阳H++Ccl，HHl:NN,3OonPODc6H,NO+HY0 2.2 试剂 2.2.1组合试剂盒 1号瓶:内含 。.2mol/L磷酸盐缓冲溶液(pH=7.0)100mL，其中4-氨基安替比林为 0.00154mol/L; 2号瓶:内含。.022mol/L苯酚溶液100mL, 3号瓶:内含葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase)400U活力单位)、过氧化物酶(辣根，peroxidase) 1000U活力单位)。 1,2,3号瓶须在4℃左右保存。 2.2.2酶试剂溶液:将1号瓶和2号瓶的物质充分混合均匀，再将3号瓶的物质溶解其中，轻轻摇动 (勿剧烈摇动)，使菊萄糖氧化酶和过氧化物酶完全溶解。此溶液须在4℃左右保存，有效期1个月。 2.2.30.085mol/L亚铁氰化钾溶液:称取3.7g亚铁氰化钾K〔4Fe(CN),·3H,O,GB1273，分析纯]， 溶于100mL重蒸馏水中，摇匀。 2.2.4 0.25mol/L硫酸锌溶液:称取7.7g硫酸锌(ZnSO,·7H,O,GB666，分析纯)，溶于100mL重 蒸馏水中，摇匀。 2.2.50.1mol/L氢氧化钠溶液:称取4g氢氧化钠(GB629，分析纯)，溶于1000mL重蒸馏水中，摇 匀。 2.2.6葡萄糖标准溶液:称取经10。士20C烘烤2h的葡萄糖(HG3-1094，分析纯)1.0000g,溶于重 一~~~~~，~~--~--州.~~~- 国家技术监督局1996一04一10批准 1996一12一01实施 GB/T16285-1996 蒸馏水中，定容至100ml