基因枪法转化小麦的金粉用量及转基因植株表型特征分析.pdfVIP

植物生理学报 , Acta Phytophysiologica Sinica 　2001 , 27( 1) :21～27 21 基因枪法转化小麦的金粉用量及转基因植株表型特征分析 安海龙 　卫志明 　黄健秋 ( 中国科学院上海植物生理研究所,上海 200032) 摘要 : 研究了不同金粉用量对小麦幼胚瞬间及稳定转 ( ) 或称挑旗期 , 以旗叶出现为标志 移至人工气候室 化频率的影响 ,结果表明此实验系统的金粉用量以每 ( μ 生长 光照时间约 14 h/ d , 光强约 200250 mol μ 枪 500 g 金粉为佳。对获得的 T0 及 T1 代植株的 - 2 - 1 ) m s ,光/ 暗温度为 25 ℃/ 20 ℃ ;或取成熟种子 PCR 及 Southern 分析证实了外源 bar 基因片段已经稳 定整合至小麦基因组中 ;对 T1 代植株的 LPPT 涂抹 经常规消毒后置于 MS0 上 26 ℃萌发2 d ,然后转入 实验表明转化植株对该除草剂的抗性水平较低 ;分析 4 ℃冰箱处理714 d ,待露白后继续处理 24 周 ,并每 了 T0 、T1 及 T2 代植株的表型特征 ,结果表明 T0 代植 周取出一次进行 3 h 的室内散射光照射以保持幼 株生长矮小、结实率低等表型方面的异常很可能只是 苗的绿色状态 ,之后将材料置于 26 ℃培养间恢复 一种由于生理及栽培原因所导致的暂时现象。 生长 23 d ,再注入浅层清水开管炼苗 23 d , 随后移 栽于人工气候室生长。取花期后 815 d 大小在 0. 关键词 : 基因枪 ,小麦 ,遗传转化 ,表型特征 学科分类号 : Q78 51.5 mm 的小麦未成熟胚 , 盾片侧向上转接于 MSD 1. 5 (MS 盐 + VB1 0. 5 mg/ L + Asn 150 mg/ L 　　小麦是世界上最重要的粮食作物之一 ,因此将 + 2 ,4D 1. 5 mg/ L + 蔗糖 20 g/ L + gelrite 2. 5 g/ 现代生物技术尤其是植物转基因技术应用于小麦 L ,p H 5. 8) 上 26 ℃暗处进行 35 d 的预培养。 的遗传改良研究便有着非同寻常的意义。自 Vasil 1. 2 　质粒 ( ) 等 1992 在世界上首次报告利用基因枪转化技术 本实验所使用的质粒分别为 pDM302 ( Cao 等 转化小麦获得转基因植株至今 ,基因枪法介导的小 ) 1992 和 pC3301 ,其图谱见图 1 。其中pDM302 携 ( 麦遗传转化研究目前在技术上已日趋成熟 安海龙