虎杖和大黄中琢鄄葡葡萄糖苷酶抑制剂的超滤质谱研究 - 分析化学.pdf

第42 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE)摇 研究报告 第4 期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2014 年4 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 552 ~558 DOI:10.3724/ SP.J.1096.2014.30594 虎杖和大黄中琢鄄葡葡萄糖苷酶抑制剂的超滤质谱研究 1,2 *1 1 *1 杨 冬 摇 刘 舒 摇 宋凤瑞摇 刘志强 1 2 (中国科学院长春应用化学研究所,长春 130022)摇 摇 (中国科学院大学,北京 100039) n 摘摇 要摇 通过体外酶活性实验结合离心超滤LC鄄ESI鄄MS 技术从富含蒽醌类成分的中药虎杖和大黄提取物中 筛选琢鄄葡萄糖苷酶抑制剂。 首先,以4鄄硝基苯鄄琢鄄D鄄吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,对虎杖和大黄提取物的体 外酶抑制活性进行了初步评价,结果表明,虎杖和大黄提取物对琢鄄葡葡萄糖苷酶的半抑制浓度分别为0.027 和0.050 g/ L。 其次,利用离心超滤技术对虎杖和大黄提取物种的潜在的琢鄄葡葡萄糖苷酶抑制剂进行了筛 n 选,并通过LC鄄ESI鄄MS 对筛选得到的潜在抑制剂结构进行了鉴定,结果显示,虎杖和大黄中各鉴定得到12 和 7种,共计16种活性小分子成分。 其中大黄素等7 种化合物属于蒽醌类;虎杖苷等5 种化合物属于多元酚 类;莲花掌甘等4种化合物都具有没食子酰基取代基。 结果表明,蒽醌类化合物具有较好的琢鄄葡萄糖苷酶抑 制活性,可以为开发新的安全有效的富含蒽醌类成分的中药降糖药物奠定基础。 关键词摇 琢鄄葡葡萄糖苷酶;超滤质谱;虎杖;大黄;抑制剂 1摇 引摇 言 糖尿病是一种持续高血糖,胰岛素相对或绝对不足,外周组织对葡萄糖利用减少的一种综合病 [1-3] 症 。 糖尿病可分为I型糖尿病、II型糖尿病、特异性糖尿病和妊娠糖尿病,其中II 型糖尿病占90% 以上。 琢鄄葡萄糖苷酶抑制剂是临床上治疗II 型糖尿病的主要药物之一,可减缓葡萄糖的生成和吸收, [4,5] 降低血糖水平 。 中药中琢鄄葡葡萄糖苷酶抑制剂的种类繁多、结构复杂,按照其基本的化学结构,目前研究结果可以 [6-7] 分为四大类:黄酮类、生物碱类、皂苷类、多糖类 ,而富含醌类成分的中药材则少有研究。 一些研究 [8,9] 结果表明,富含醌类成分的中药材中具有很强的琢鄄葡葡萄糖苷酶抑制活性 ,但缺乏进一步的实验筛 选、分析、鉴定其潜在的活性小分子成分。 因此,从富含醌类的中药材中筛选琢鄄葡葡萄糖苷酶抑制剂, 并对其进行分析和结构鉴定,可以为进一步临床药物开发提供一定的理论依据和研究基础。 [10] 超滤技术 主要是利用亲和原理,将具有潜在活性的小分子化合物与受体混合,得到受体鄄配体复 合物和未结合的小分子,通过超滤薄膜将未结合的小分子滤除后,复合物可以用有机溶剂处理,将小分 n 子配体释放出来,从而实现活性化合物与非活性化合物的分离,并通过L