胶原模拟多肽三螺旋结构的热变性过程 - 中国医学科学院学报编辑部.pdf

中 国 医 学 科 学 院 学 报 ＡＣＴＡＡＣＡＤＥＭＩＡＥＭＥＤＩＣＩＮＡＥＳＩＮＩＣＡＥ ·短篇论著 · 胶原模拟多肽三螺旋结构的热变性过程 龙１ １ １ １ １，２ 　 刘　 ，刘玲蓉 ，陈名懋 ，杨文智 ，张其清 天 １中国医学科学院　北京协和医学院　生物医学工程研究所天津市生物医学材料重点实验室，天津 ３００１９２ ２厦门大学　材料学院生物材料系生物医学工程研究中心福建省生物医学工程重点实验室，福建厦门３６１００５ 通信作者：张其清　电话：０２２电子邮件：ｚｈａｎｇｑｉｑ＠１２６ｃｏｍ 　　关键词：胶原蛋白；三螺旋结构；热变性 中图分类号：Ｑ５１８４　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１０００５０３Ｘ（２０１０）０３０３４３０４ ＤＯＩ：１０３８８１／ｊｉｓｓｎ１０００５０３Ｘ２０１００３０２３ 　　氨基酸重复序列是很多纤维状蛋白质特征，这 ０１ｎｍ，扫描速率 １００ｎｍ／ｍｉｎ，狭缝宽度 １ｎｍ，响 ［１］ 些序列促进每种蛋白形成自己的拓扑结构 。胶原 应时间１ｓ，灵敏度 ｓｔａｎｄａｒｄ（１００ｍｄｅｇ），记录结果 蛋白ＧｌｙＸＹ肽段的重复出现使得胶原二级结构呈 为３次扫描平均值。 现特征性的聚脯氨酸 型 （Ｐ２）结构，Ｐ２结构进一 傅立叶红外分析　将 ＣＭＰ溶于重水配制终浓度 Ⅱ 步形成稳定的三螺旋结构，这是胶原蛋白区别于其 为５ｇ／Ｌ的溶液，将ＣＭＰ溶液于４℃放置４８ｈ后进行 ［２］ 红外光谱检测。光谱采集采用 Ｎｉｃｏｌｅｔ公司液体变温 他蛋白质的特征性结构 。胶原蛋白的三螺旋结构 在机体生命活动中发挥着极为重要的作用，胶原缺 附件，窗片之间距离为２５ ｍ，将４０ ｌ样品溶液注 μ μ ［３］ 入ＣａＦ晶体窗片之间后密封。扫描条件设置为：扫 失及三螺旋结构改变会导致多种人类疾病发生 。 ２ 本研究以具有氨基酸重复序列的胶原模拟多肽 （ｃｏｌ －１ 描次数６４次，分辨率２ｃｍ ，在不同温度条件下测 ｌａｇｅｎｍｉｍｅｔｉｃｐｅｐｔｉｄｅｓ，ＣＭＰ），即 （ＧｌｙＰｒｏＨｙｐ）作 －１ ７ 量ＣＭＰ溶液位于 １７００～１６００ｃｍ 的光谱。得到的 为胶原蛋白三螺旋结构模型分子，采用圆二色谱和 谱图在ＯＭＩＮＣ软件下进行数据处理，应用溶剂峰差 傅立叶红外光谱两种光谱学方法对其三螺旋结构及 减和傅立叶去卷积等方法进行数据处理，对处理后 热诱导变性过程进行研究，旨在进一步认识胶原蛋 红外谱线进行高斯／洛仑兹拟合。 白三螺旋结构受温度影响的相关机制。 结　　果 材料和方法