甘薯块根储藏蛋白(sporamin)启动子克隆及功能验证cloning and .pdf

分子植物育种(网络版), 2012 年, 第10 卷, 第1511-1517 页 Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1511-1517 研究报告 A Letter 甘薯块根储藏蛋白(Sporamin)启动子克隆及功能验证 1 3 1 1 1 2 2 1 张聪 , 郑雪莲 , 蒲志刚 , 张婷 , 吴洁 , 谭文芳 , 王大一 , 阎文昭 1.四川省农业科学院生物技术核技术研究所, 成都, 610066 2.四川省农业科学院作物研究所, 成都, 610066 3.电子科技大学生命科学学院, 成都, 610054 通讯作者: wzyan@ 作者 分子植物育种, 2012 年, 第10 卷, 第70 篇 doi: 10.5376/.2012.10.0070 收稿日期：2012 年06 月29 日 接受日期：2012 年07 月20 日 发表日期：2012 年12 月20 日 本文首次发表在《分子植物育种》(2012 年第10 卷第6 期707-713 页)上。现依据版权所有人授权的许可协议，采用 Creative Commons Attribution License 协议对其进行授权，再次发表与传播。只要对原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条件的使用与传播。 引用格式(中文) ： 张聪等, 2012, 甘薯块根储藏蛋白(Sporamin)启动子克隆及功能验证, 分子植物育种(online) Vol.10No.70 pp.1511-1517 (doi: 10.5376/.2012.10.0070) 引用格式(英文) ： Zhang et al., 2012, Cloning and Sequence Analysis of the Promoter of Sporamin Gene from Sweetpotato (Ipomoea batatas) , Fenzi Zhiwu Yuzhong (online) (Molecular Plant Breeding) Vol. 10 No.70 pp. 1511-1517 (doi: 10.5376/.2012.10.0070) 摘 要 提取甘薯“川薯34 ”总DNA，设计引物，通过高保真PCR 扩增获得了长为1 144 bp 的甘薯储藏蛋白(Sporamin)基 因启动子SpoA-p 。PLACE 在线分析表明：Sporamin 启动子具有基本的启动子元件CAAT-box ，并包含大量与储藏蛋白表达 相关、抗逆相关及蔗糖表达相关的功能组件。构建植物表达载体pBISpoA-p::GUS、农杆菌工程菌株EHA105 ：pBI-SpoA-p::GUS 后导入烟草及甘薯，分别得到 15 株烟草和 10 株甘薯的阳性转基因植株，GUS 染色分析表明烟草各部位中只在根中有基因 表达，甘薯根、茎和叶各部位未检测到活性。5%蔗糖诱导处理24 h 后，在烟草根、茎及叶均观察到GUS 活性；在甘薯中 只有根有GUS 活性。因此，可以看出此启动子为甘薯根部特异的表达启动子，并受蔗糖诱导而表达。 关键词 甘薯; 储藏蛋白基因; 启动子; 植物表达载体; 蔗糖诱导; 根部特异的表达 Cloning and Sequence Analysis of the Promoter of Sporamin Gene from Sweetpotato (Ipomoea batatas) 1 3 1 1 1 2 2 Zhang Cong , Zheng Xuelian