增强间充质 干细胞的趋化与疾病治疗 - igem 2016.pdf

增强间充质⼲细胞的趋化与疾病治疗 李彤，李启豪，苏晓均，黄之佩，周龙源，陈钦昌 摘要 间充质⼲细胞（Mesenchymal Stem Cells, MSCs ）是⼀群具有⾃我更新与多向分化潜能 的成体⼲细胞，具有免疫调节 、促进组织再⽣、旁分泌和抗炎等作⽤，并且倾 向于趋化到 炎症或损伤部位，具有⼴⼤的治疗前景。但是体外培养的 MSCs 在体内趋化到损伤组织的 效率低下 ，为了达到更好的治疗效果，多项研究认为增强其趋化是⼗分有效的策略，本⽂ 主要从 MSCs 分离培养的状况，细胞修饰、基因修饰和靶器官修饰等⽅⾯讲述了增强 MSCs 趋化的⽅法，为优化 MSCs 的疾病治疗⽅案提供参考。 关键词： MSC ；趋化因⼦；趋化受体；基因修饰；细胞修饰 0. 引⾔ 间充质⼲细胞 (MSCs), 是⼀群具有⾃我更新与多向分化潜能的成体⼲细胞，易于分离 和体外培养。 MSCs 的来源有⾻髓、胎盘 、脐带⾎、脂肪组织 、肌⾁组织 、⾓膜基质和⽛ 髓等等[1] 。2006 年，国际⼲细胞协会提出了间充质⼲细胞⾄少要具备的三个特点：1. 贴壁 ⽣长；2. 细胞表⾯标志物 CD73 、 CD90 、和 CD105 阳性，⽽ CD45 、CD34 、CD14 、 CD11b、CD79a 和 HLA-DR 阴性；3. 能够体外分化为⾻、脂肪和软⾻[2] 。MSCs 的多能性和 低免疫原性，使其成为细胞治疗的⼀颗新星。1995 年⾸次报道 MSCs 应⽤于临床实验，现 在 MSC s 已被⼴泛地⽤于临床实验研究，部分也已⽤于临床治疗，如移植物抗宿主病 (GVHD)[3] [4]、软⾻和⾻损伤[5]、充⾎性⼼⼒衰竭[6]、急性⼼肌梗死[7]、II 型糖尿病[8]等，⽽且 在⽪肤[9] 、肌⾁[10]和肺的损伤修复中也有良好进展。 MSCs 应⽤于临床实验时，⽤药⽅式只能以注射给药，因疾病的发⽣部位不同，其注 射⽅式也有所不同——主要有系统注射和局部注射[11] 。系统注射又分为经静脉注射和经动 脉注射，其中，经静脉注射损伤⼩，风险低，故使⽤率最⾼ 。但是，实验证明，经静脉注 射的 MSCs ⼤部分都聚集在肺部，有效趋化到损伤部位的 MSC 数量较少，可能的原因为体 外培养的 MSCs 体积较⼤，经⾎液循环⾄肺时易潴留[12] 。经动脉注射会相对提⾼ MSCs 向 损伤组织的趋化效率，但是体积较⼤的 MSCs 易在微动脉聚集。在猪急性⼼肌缺⾎模型中 使⽤ MSCs 经冠状动脉注射治疗，发现了微⾎栓的产⽣，在其他治疗休克的研究中也发现 了微⾎栓的形成，提⽰经动脉注射 MSCs 存在较⾼的治疗风险[13] 。局部注射可使 MSCs ⽴ 即达到损伤部位，⽐如⾻损伤时通过⼿术介⼊注射 MSCs ，但是注射部位 MSCs 浓度较⾼， 导致局部氧⽓和营养相对不⾜，进⼊受损组织的 MSCs ⽣存率⼤⼤降低[14] 。与局部注射相 ⽐，系统注射的 MSCs 可以到达全⾝，可以治疗多种全⾝性疾病，但是缺点也⾮常明显— —趋化效率低。实验证 明，系统注射 MSCs ，只有⾮常少的细胞是真正到达受损部位发挥 治疗的作⽤。提⾼ MSCs 的趋化是提⾼疗效的⼀个重要突破点。 1. 背景 系统注射后，MSCs 会向损伤组织归巢，⽬前为⽌，归巢的机制还没有完全研究清楚， 现在研究者对 MSCs 归巢的见解，是从研究⽩细胞迁移到发炎的组织，造⾎⼲细胞的迁移 和癌细胞转移中得来的[15][16] 。归巢是依赖于趋化受体及其对应的结合配体 ，MSCs 到达组织 周围的⾎管时， 细胞需要接触到内⽪细胞并从内⽪细胞间的缝隙穿过达到靶组织[17] 。多项 研究证明，趋化因⼦和趋化受体在 MSCs 归巢和趋化过程中扮演⾄关重要的⾓⾊[18] 。 趋化因⼦，是炎症状态或损伤部位产⽣的，长度在 7-13kDa 的带电短肽 。⽬前已发现 四个趋化因⼦家族，分别是含有相邻半胱氨酸残基的 CCL 家族，含有被⼀个氨基酸隔开的 半胱氨酸的 CXCL 家族，只含有两个半胱氨酸的 CL 家族和含有被