羟自由基、低密度脂蛋白和胆固醇对血管内皮细胞钙响应能力的影响.pdf

北 京 大 学 学 报 （ 医 学 版 ） aDC47( D* X;O^= C^b;4M^LB（H;7(LH M/^;/;M ） b-+% $2 -% 8 )IT% #$ ·8!$ · ·论著 · 羟自由基、低密度脂蛋白和胆固醇对血管 内皮细胞钙响应能力的影响 ! # ! ! !，$ ! ! !，$ 冯晓靖 ，袁 兰 ，苟宝迪 ，王和平 ，张天蓝 ，许善锦 ，王 夔 （北京大学!% 药学院化学生物学系；# % 医药卫生分析中心；$% 天然药物及仿生药物国家重点实验室，北京 !’$ ） ()( ；胆固醇 ［关键词］钙内皮，血管；羟自由基；脂蛋白类， ［摘 要］目的：探讨分别经羟自由基、低密度脂蛋白和胆固醇处理后，血管内皮细胞对外钙浓度增加的响应能力 的改变，为研究动脉粥样硬化的发生发展机制提供新线索。方法：用人脐静脉内皮细胞作为模型细胞，分别用羟自 由基、低密度脂蛋白、胆固醇和氧化胆固醇进行单独或组合处理，利用*+,-.$ 荧光标记细胞内游离/0# 1 ，以激光共 /0# 1 ］增加时胞内［/0# 1 ］的变化。结果：正常血管内皮细胞对胞外［/0# 1 ］增加响应 聚焦手段考察了当细胞外液［ 灵敏，胞内［/0# 1 ］升高到一定程度后，迅速下降至初始水平；细胞经羟自由基处理后，对/0# 1 的响应明显迟钝，胞 内［ # 1 # 1 /0 ］达到峰值的时间延长了$2 3 ，细胞形态也有损伤迹象；细胞经低密度脂蛋白处理后，胞内［/0 ］达到峰 值的时间延长了#2 3 ，且对［/0# 1 ］的调节作用明显失常，使细胞处于高钙水平；而细胞经羟自由基和低密度脂蛋 白依次处理后，细胞内［/0# 1 ］达到峰值的时间延长了2 3 ，损伤程度更大，当胞外［/0# 1 ］增加时细胞破裂死亡；细 胞经胆固醇处理后，当胞外［ # 1 # 1 /0 ］突然升高时，胞内［/0 ］不仅没有升高，反而缓慢降低；细胞经羟自由基和胆固 醇依次处理后，对胞外［/0# 1 ］的突然升高反应紊乱。结论：羟自由基、低密度脂蛋白和胆固醇可干扰血管内皮细胞 对钙离子的响应，致内皮细胞损伤，这可能是此类致病因子引起动脉粥样硬化的机制之一。 ［中图分类号］ 425$6 2 ［文献标识码］7 ［文章编号］!89 !.!89:（#$ ）8.8!$.2 !#$% ’ ()*+’,)- +.*/$.- ，-’0 *#1/%) -/2’2+’%#/1 .1* $(’-#%#+’- ’1 %(# $.-$/345 +#2’1*/16 7#(.8/’+ ’ 8.$3-.+ #1*’%(#-/.- $#-- *;= :0-?@A! ，BC7 (0@# ，=DC E0-F! ，G7= HIJ@A! ，KH7= L0@+0@!，$ ! ，:C MN0@?@! ，G7= O,!，$ （!% )IJ0PQRI@Q -S /NIRT0+ E-+-AU ；# % VIFT0+ 0@F HI0+QN 7@0+U33 /I@QIP ；$% LNI MQ0QI OIU (