原创力文档- 1、本文档共10页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
查看更多
实验10 苹果中多酚氧化酶最适温度的测定
实验10 苹果中多酚氧化酶 最适温度的测定 江南大学《食品化学》课程小组 一、目的 了解多酚氧化酶所催化的反应及酶促褐变的原理 熟悉多酚氧化酶活力测定的方法，能独立完成多酚氧化酶的提取和活力测定。 二、仪器及材料 仪器 天平、组织捣碎机、水循环真空泵、抽滤瓶、布氏漏斗、滤纸、电吹风、磁力搅拌器、转子、水浴锅、制冰机、分光光度计 样品和试剂 冻藏苹果小块、0.05 mol/L磷酸盐缓冲液（pH 6.5）、丙酮、0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH 6.5）、0.01mol/L儿茶酚溶液 三、原理 Polyphenol oxidase (PPO) 四、实验步骤 1、多酚氧化酶粗提液的制备 2、不同温度下多酚氧化酶的活力测定 五、数据处理 1、以吸光值为纵坐标，反应时间为横坐标，作出反应曲线，从曲线最初的直线部分的斜率计算出多酚氧化酶的活力，每分钟吸光值增加1定义为一个酶活力单位。 2、以酶活力为纵坐标、温度为横坐标，作出酶活力-温度关系曲线，由曲线确定苹果多酚氧化酶的最适温度。 六、思考题 1、在制备多酚氧化酶的粗提液过程中，需要注意什么？ 2、为何要将丙酮先冷却至-26℃？ 3、比色时应采用什么体系作为参照？ 参考资料 http://www-saps.plantsci.cam.ac.uk/osmoweb/ppo.htm /Shop/ZSA1006/6933/ProShow.html 江南大学精品课程建设 多酚氧化酶催化的反应 一元酚羟基化 邻-二酚氧化 酶促褐变 均质 迅速抽滤 沉淀 滤液 多酚氧化酶提取液 冷风吹至无丙酮味 冷冻离心 溶于pH6.5磷酸盐缓冲液 冰浴搅拌 冷冻苹果块+ -26℃丙酮 分别于5、15、25、35、45、55 ℃下搅拌保温5 min 立即搅匀 多酚氧化酶活力计算 冷风吹至无丙酮味 读取400 nm下吸光值的变化 0.2mol/L磷酸盐缓冲液和儿茶酚溶液 多酚氧化酶提取液
文档评论（0）