人胃癌细胞肿瘤相关基因的表达与甲基化调控的初步分析.pdfVIP

中文摘要 人胃癌细胞肿瘤相关基因的表达与甲基化调控 的初步研究 中文摘要 胃癌是威胁我国人民健康的最主要的肿瘤之一。胃癌的发生同其它肿瘤一 样，有癌基因的过度表达和／或抑癌基因的失活。而在基因表达调控中，DNA甲 基化在肿瘤的发生和发展中扮演着极其重要的角色，甲基化异常是通过影响癌基 因和抑癌基因的表达以及基因组的稳定性而参与肿瘤的发生与发展的。 本研究旨在阐明胃癌的发生中多种抑癌基因和癌基因的甲基化情况，以期为 进一步深入探索通过改变抑癌基因的甲基化而为胃癌治疗提供新的方法。 我们培养人胃癌细胞株MKN-45和HGC一27两种细胞，在MTT确定去甲基化 预24h和72h，然后提取其DNA、RNA和蛋白质，分别以RT—PCR和Western blofting 1，DNMTl)表达；用RT—PCR的 检测DNA甲基化酶1(DNAemthylatransferase 赫修饰测序和甲基化特异性PCR的方法检测pj∥…基因启动子区和c-myc基因 甲基化的情况。 我们的研究表明(1)MTT比色法提示，该研究所采用5-aza—dC的浓度和时 的表达而MKN～45表达微弱，以Western 系中均有p，∥…表达， 中pl∥“的表达增强，且不同的胃癌细胞株表达增强最明显时的时间与浓度不 干预前后无明显变化。(5)流式细胞仪分析HGC一27的细胞周期结果显示在 改变。(6)亚硫酸氢盐修饰和测序检测p』∥“基因启动子区甲基化结果显示在 中文摘要 5-aza—dC干预后两种细胞均有部分CpG岛的胞嘧啶的甲基化。 本研究证实人胃癌细胞系MKN一45和HGC一27中，p』∥…启动子区的甲基化是 其在胃癌细胞系表达减弱的主要原因。p，∥…去甲基化程度取决于5-az,a—dC干 预的时间和浓度。这对于我们进一步深入探索通过改变抑癌基因的甲基化而研究 胃癌分子治疗的新方法具有重要的意义。 p』∥…； 抑癌基因； 癌基因； 细胞周期 2 英文摘要 onDNA of Preliminary study methylation regulatesexpression inhuman cancercelllines genes gastric Abstrct Objective canceris ofthemostcommon andthe causeof Gastric one major malignancy leading cancer—related inChina．The oftumor genes mortality expression suppressor are and isover—expression includingp16INK4Adown—regulatedc—mycproto—oncogene of most human