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实验四 溶血性实验 【实验目的】通过本实验认识溶血现象，并掌握溶血性实验 的基本操作。 【实验原理】溶血是指红细胞破裂、溶解的一种现象。多种 中草药（如党参、桔梗和三七等）含有皂甙， 皂甙是一类表面活性剂，有很强的乳化力，具 有溶血作用。另外大量输入低渗溶液以及含有 某些甾体化合物的注射液也可以引起溶血。在 溶血性检查中可附带检查供试品有无红细胞凝 集作用。 【器 材】离心机、恒温箱、试管、移液管 【药 品】红细胞悬液、吐温-80、生理盐水 实验方法 1、2%红细胞悬液的制备 取新鲜兔血10-20ml，用竹签搅拌以除去 纤维蛋白，再用生理盐水冲洗3-5次。每次加生理盐水5-10ml，混 匀后离心（4000rpm/min离心5min），弃去上清夜，再加入生理 盐水，离心，直至上清夜不成红色为止。然后按所得红细胞的溶 剂，用生理盐水配成2%的悬液。 2、取七只试管，编号，按下表依次加入各种溶液。摇匀后置37℃ 恒温中保温，观察0.5、1、2、3小时各管内的溶血情况。 试 管 1 2 3 4 5 6 7 吐温-80(ml) 0.1 0.3 0.5 0.7 0.9 -- -- 生理盐水(ml) 4.9 4.7 4.5 4.3 4.1 5.0 蒸馏水5.0 2%红细胞悬液(ml) 1 1 1 1 1 1 1 ? 写出各管的结果、分析原因。 ? 结果处理 全溶血：溶液澄明，红色，管底无红细胞残留物。 部分溶血：溶液澄明，红色或棕色，底部尚有少量红细胞残留。镜检 细胞稀少或变形。 不溶血：细胞全部下沉，上层液体无色澄明。镜检红细胞不凝集。 凝集：虽不溶血但红细胞凝集，经振摇后不能分散，或出现药物性沉 淀。 一般认为凡1小时后第3号试管以及第3号以前的各管出现溶血、部 分溶血或凝集反应的制剂均不宜供静脉注射用。 思考题 1、什么叫溶血现象？与药物有关的哪些因素可以引起溶血现象？ 2、如何进行溶血性试验？其结果如何判断？ 【注意事项】 1、供采血的动物可采用家兔、羊、狗和大鼠。 2、本试验使用的2%红细胞悬液，也可用2%全血的生理盐水混悬液。两种混悬液的试验结果基本一致。但前者溶液澄明，易于观察，而后者操作方便。在半小时内溶液澄明，变成黄或棕黄色，并有棕黄色絮状沉淀，表示药液中有凝集血细胞蛋白的因素。这是可取凝集液一滴置于载玻片上，在显微镜下可见红细胞凝集，在盖玻片周围滴加生理盐水，凝集的红细胞能被冲散则为假凝集，不被冲散则为真凝集。 4、如有假凝集现象，而必须进行溶血试验者，可在药液中先加入1%鸡蛋白或明胶液，以除去凝集因素，在进行试验。