溶胶2凝胶固定技术的生物组织传感器.pdfVIP

( ) 第 32 卷 分析化学 FENXI HUAXU E 　研究报告 第 10 期 　　 　　　　　　　　 　　　　 　　　　　　 2004 年 10 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1291～1294 基于溶胶凝胶固定技术的生物组织传感器 1 1 ,2 1 1 1 李敏健 　谭学才 　梁汝萍 　邹小勇 　蔡沛祥 1 ( ) 2 ( ) 中山大学化学与化学工程学院 , 广州 510275 　　 广西民族学院化学与生态工程学院 , 南宁 530006 摘 　要 　报道了一个制备生物组织传感器的新技术。将溶胶凝胶与植物液汁按一定比例结合 ,使天然植物 中的多酚氧化酶被固定于溶胶凝胶中 ,将其滴涂于预先涂有一层 Nafion 膜的铂盘电极表面 , 构成带有 Nafion溶胶凝胶植物液汁的复合修饰膜的生物传感器 ,用于测定神经递质多巴胺。采用循环伏安法和线性 扫描伏安法考察了传感器的电化学特性 , 比较了不同植物品种及其不同部位组织的生物催化活性;研究了乙 醇用量、水酯比、植物液汁用量等因素的影响 ;考察了 Nafion 膜的防干扰性能。采用差示脉冲伏安法对多巴 胺进行定量分析 ,线性范围为 2 ×10 - 6 ～1 ×10 - 4 mol/ L ; 检出限为 8. 0 ×10 - 7 mol/ L 。与传统的组织电极相 比 ,本传感器具有一系列特点。 关键词 　溶胶凝胶 ,固定化技术 ,植物组织传感器 ,多巴胺 ,化学修饰电极 1 　引　　言 酶是生物体产生的富有生物活性的一类蛋白质 , 由于其高效的催化性能及反应的专一性,因此,在分 析化学中应用广泛1 ,其中酶传感器是研究十分活跃的一个方面。早在 20 世纪 70 年代 ,酶电极已经问 世2 。目前,酶电极已应用于糖类、醇类、有机酸、氨基酸、激素及三磷酸腺苷等的测定 ,成为生物、医学、药 物、生命科学等方面研究的有效手段3 。酶电极是以固定化酶作为敏感元件的生物传感器,通常是利用纯 净的酶进行制备。由于酶的提取和纯化工艺复杂 ,价格昂贵 ,因此在应用上受到一定限制。继酶电极问世 4 ,5 ( ) 后 10 年 ,出现了生物组织电极 。它是直接利用生物 植物或动物 组织中的酶作为分子识别元件 ,实质 上它也是酶电极。由于大自然中酶源丰富 ,生物材料价廉易得 ,所以 ,组织电极一度受到分析化学家重视 , 国内外先后有综述报道6 ～8 。但组织电极的主要缺点是酶容易从组织薄膜的表面流失,影响电极稳定性 , 且生物材料会腐败变质 ,使用寿命短 ,影响其实际应用。本工作提出利用溶胶凝胶与生物组织液汁结合 制备生物传感器的新方法。由于组织液汁中的水分参与溶胶凝胶的水解、缩聚等过程而被消耗 ,留下其 中的酶则被包埋于溶胶凝胶的三维网络中 ,从而简便、有效地实现对生物组织中酶的提取与固定。本法 既保持了传统组织电极直接利用天然酶源的特点 ,又避免了传统组织电极固有的弊端。本实验以利用植 ( ) 物组织中多酚氧化酶对神经递质多巴胺 DA 进行电催化氧化为例开展研究 ,结果表明 :利用溶胶凝胶固 定技术是制备组织传感器的另一个新途径 ,是对天然酶源开发利用的新手段。 2 　实验部分 2 . 1 　仪器与试剂