普鲁士蓝染色试剂盒(Perlsstain,伊红法).pdfVIP

普鲁士蓝染色试剂盒 （Perls stain，伊红法）使用说明 产品简介 ： 含铁血黄素 （Hemosiderin ）是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄 色颗粒，因其含铁、金黄色，故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬 后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含 铁血黄素。 Perls 普鲁士蓝反应 （Prussian blue reaction ）又称为含铁血黄素染色， 即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞内会间质内， 主要显示三价铁盐。Perls 普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应，是显示组织 内三价铁的一种敏感、传统优 良的方法，其染色原理为：亚铁氰化钾溶液使 三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁氰化钾反应，生成 一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物普鲁士蓝，所以该反应被称 为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁氰化物是一种很稳定的化合物，在反应后可 用红色染色剂进行复染，如核固红、伊红、中性红等。 Perls stain 常用于显示局部组织内各种出血性病变， 常见于吞噬细胞内。 在判断含铁血黄素沉积时，用 Perls 反应可以得到证实，该染色方法可以很 好的区分含铁血黄素和其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易 产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。 普鲁士蓝染色试剂盒 （Perls stain ，伊红法） ，其复染液采用伊红染色 液，也是常用的复染液，该复染液染色时间较核固红染色液要短。 产品组成 ： 规格 2 ×50ml 2 ×100ml Storage Perls stain A 25ml 50ml RT 避光 Perls stain B 25ml 50ml RT 临用前，取 A1、A2 等量混合，即为试剂(A)Perls stain，不宜提前配制。 试剂(B): 50ml 50ml RT 避光 伊红染色液 使用说明书 1 份 主要成份 ： 试剂(A): 主要由亚铁氰化钾、稀酸等组成。 试剂(B): 主要由伊红、防腐剂等组成。 自备材料： 1、10% 的中性福尔马林 2、系列乙醇 3、蒸馏水 、 的多聚甲醛 4 4% 操作步骤 （ 仅供参考 ） ： （ 一 ） 石蜡切片染色 1、 切片脱蜡至水 ① 二甲苯 Ⅰ ～ ( ) 5 10min ② 二甲苯 Ⅱ ～ ( ) 5 10min ③无水乙醇 Ⅰ （可选） ～ ( ) 3 5min ④无水乙醇( Ⅱ) （可选） 3～5min ⑤95% 的乙醇 3～5min ⑥90% 的乙醇 3～5min ⑦80% 的乙醇 3～5min ⑧ 自来水或蒸馏水冲洗( Ⅰ) 1～3min ⑨ 自来水或蒸馏水冲洗( Ⅱ) 1～3min 2、染色 ①切片入 Perls stain （见注意事项 6 ） 15～30min ②蒸馏水充分冲洗 5～10min ③伊红染色液淡染细胞核 15～30s ④ 自来水冲洗 1～5s 3、脱水、透明、封固 ①90% 乙醇 10～20s ②95% 乙醇( Ⅰ) 1～2min ③95% 乙醇( Ⅱ) 1～2min ④ 无水乙醇( Ⅰ) 2～3min ⑤无水乙醇( Ⅱ) 2～3min