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试验霉菌的形态观察与鉴定
实验七 霉菌的形态观察与鉴定 1.豆腐进行霉菌发酵,表面生长出一层白色茸毛(即菌丝)的豆腐。2.不同季节(不同温度、湿度、发酵时间)根据菌丝颜色、长度的不同可分为虎皮毛、鼠毛、兔毛和棉毛四种,以兔毛和棉毛为质量最佳。 4. 操作程序 四 思考题 青霉、曲霉、根霉、毛霉的形态有哪些异同? 比较显微镜下放线菌和霉菌的细胞形态和菌落的特征 ? * * 一、实验目的 (1) 学会霉菌的载玻片培养法 (2) 了解青霉、曲霉、根霉及毛霉的形态构造 (3) 霉菌的无性孢子和有性孢子的形态观察 无性孢子:根霉,毛霉------ 孢囊孢子 曲霉,青霉------ 分生孢子 有性孢子:根霉,毛霉------ 接合孢子 二、实验原理 霉菌为真核微生物,菌丝较粗大(直径:3-10um, 与酵母菌相似,比细菌或放线菌的细胞约粗10倍);有分枝或不分枝的。 菌丝体为无色透明或暗褐色至黑色,或呈现鲜艳的颜色。在显微镜下观察时,菌丝皆呈管状。在固体培养基上生长,为绒毛状或棉絮状。 一些较高等的霉菌丝状管道中皆有横隔(有隔菌丝----- 青霉属(Penicillium),曲霉属(Asepergillus);无隔菌丝-----毛霉属(Mucor),根霉属(Rhizopus))由横格状菌丝隔成许多细胞。细胞易收缩变形,而且孢子很容易分散。 观察霉菌的形态的常用方法 直接制片观察法:是将培养物置于乳酸石炭酸棉蓝染色液中,制成霉菌制片镜检。用此染液制成的霉菌制片的特点是:细胞不变形;具有防腐作用,不易干燥,能保持较长时间;能防止孢子飞散;染液的蓝色能增强反差。必要时,还可用树胶封固,制成永久标本长期保存。 载玻片培养观察法:用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在载玻片和盖玻片之间的狭窄空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后,将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态,观察到它们不同阶段的生长、发育状况,特殊形态构造,如曲霉的足细胞、分生孢子、顶囊等生长情况。 玻璃培养观察法 透明胶带法 三、实验材料与方法 1.菌种:青霉、黑曲霉、根霉、毛霉。 青霉 2.繁殖:分生孢子 球形、椭圆形或短柱形,光滑或粗糙,大部分生长时呈蓝绿色 1.形态特征:菌丝有隔,基部无足细胞。具分子孢子梗 ----- 经过多次分枝,产生几轮对称或不对称的小梗 ----- 扫帚状分生孢子头。 3.应用:抗生素 Fungal Mycelium with Spores, Penicillium sp. (SEM x3,220) Conidiospores of Penicillium 曲霉 2.繁殖:分生孢子 1.形态特征:菌丝有隔,具足细胞、分生孢子梗及膨大顶囊。 3.应用:酿造酒、酱,有机酸、酶制剂。 在幼小而活力旺盛时,菌丝体产生大量的分生孢子梗。分生孢子梗顶端膨大成为顶囊,一般呈球形。项囊表面长满一层或两层辐射状小梗(初生小梗与次生小梗)。最上层小梗瓶状,顶端着生成串的球形分生孢子。以上几部分结构合称为“孢子穗”。孢子呈绿、黄、橙、褐、黑等颜色。 ------ 曲霉孢子穗的形态,包括分生孢子梗的长度、顶囊的形状、小梗着生是单轮还是双轮,分生孢子的形状、大小、表面结构及颜色等,都是菌种鉴定的依据。 Black Mold, Aspergillus variecolor. (SEM x2,315) 曲霉Aspergillus 的分生孢子 毛霉 2.繁殖:孢囊孢子、厚垣孢子、接合孢子。 1.形态特征:菌丝发达,白色无隔多核。 3.应用:腐乳:蛋白酶 Mucor sp. ?????????????????????????????????? ????????????????????????????????????????? 毛霉属(Mucor):孢囊梗直接从菌丝上长出,孢囊梗单生,直立、分枝或不分枝。不产生匍匐丝与假根。引起果实和贮藏器官的腐烂。 根霉 2.繁殖:孢囊孢子、厚垣孢子、接合孢子。 1.形态特征:菌丝发达。具假根和匍匐菌丝。 3.应用:糖化菌(淀粉酶) 有假根和匍匐丝,孢囊梗2-3根丛生,不分枝,从匍匐枝上长出,孢囊梗与假根对生。孢子囊基部有一个近球形的囊轴。孢子囊球形或近球形,成熟后呈黑色。孢子囊壁破裂后,散出大量的孢囊孢子。 孢囊孢子萌发产生芽管。匐枝根霉是异宗配合的,当两个不同交配型的菌株(“十”菌株和“一”菌株)相遇,从菌丝上分别产生称作原配子囊的分枝,以配子囊配合的方式进行质配,最后发育成黑色、厚壁、带有瘤状突起的接合孢子。接合孢子萌发时,一般是形成芽管,芽管顶端形成孢子囊,孢子囊中产生有“十’、“一”分化的孢囊孢子。 接合孢子 Bread Mold Spores o
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