酶活性的调课.ppt

辅助因子的作用 : ①参与酶的活性中心，维持酶分子发挥催化作用所必需的构象； ②在酶蛋白与底物之间起桥梁作用； ③中和阴离子，降低反应中的静电斥力； ④传递电子、质子或一些基团。 （二）、酶的活性中心与必需基团 1. 酶的活性中心 (active center) 酶的活性中心就是酶分子在三维结构上比较靠近的少数几个氨基酸残基或残基上某些基团构成的特定的空间构象，是酶与底物结合并发挥其催化作用的部位,所以一般处于酶分子表面或缝隙中。 2. 必需基团(essential group) 酶活性中心及活性中心以外对于维持酶的活性有重要作用的一些化学基团称为酶的必需基团。 有些基团虽然不参加酶的活性中心的组成，但为维持酶活性中心应有的空间构象所必需，这些基团是酶的活性中心以外的必需基团。 常见的必需基团有组氨酸的咪唑基、丝氨酸的羟基、半胱氨酸的巯基等。 （三 ）、同工酶 (isoenzyme) 同工酶：是指催化相同的化学反应，而酶蛋白的分子结构、理化性质以及免疫学性质不同的一组酶。 乳酸 丙酮酸 第二节 酶促反应的特点与机制 酶作为生物催化剂，具有一般催化剂的共性： ①在化学反应前后酶的质和量不变； ②只催化热力学允许的化学反应， ③只能加速可逆反应的进程，而不改变反应的平 衡点。 （1）极高的催化效率 （2）高度的特异性 绝对特异性：作用于一种底物。（如脲酶等）。 相对特异性：作用于一类底物或一种化学键 （如酯酶、胰蛋白酶等）。 立体异构特异性 （如乳酸脱氢酶、延胡索酸酶等）。 （3）酶活性的可调节性 （4）酶的高度不稳定性 能使蛋白质变性的理化因素如强酸、强碱、重金属盐、高温、紫外线、X射线等均可影响酶活性，甚至使酶完全失活。酶催化作用一般需要比较温和的条件，如常温、常压、接近中性的pH值等。 （二）酶促反应机制 第三节 酶促反应动力学 酶促反应动力学是研究各种因素对酶促反应速度的影响及其规律。 影响酶促反应的因素有： 一、底物浓度对反应速度的影响 （一）、米氏方程(Michaelis equation) 验证 [S]很大，[S] Km， 说明反应为零级反应 （二）Km的意义 1、Km是反应速度为最大值的一半时的底物浓度。 2、不同的酶具有不同的Km值，它是酶的一个重要的特征常数。一般只与酶的性质有关，而与酶的浓度无关。当pH，温度和离子强度等因素不变时，Km是恒定的 。 二 酶浓度对反应速度的影响 当[S]＞＞[E]，则酶促反应速度与酶的浓度变化成正比 ，即V=κ3［E］。 三 温度对反应速度的影响 双重影响:一方面，当温度升高时，反应速度加快，另一方面，随温度升高，酶逐步变性，酶促反应速度降低。 最适温度:酶促反应速度最大时的环境温度。与底物浓度，介质pH，离子强度，保温时间等因素有关。 四 pH对反应速度的影响 五 抑制剂对反应速度的影响 凡能使酶活性下降而不引起酶蛋白变性的物质 称做酶的抑制剂(inhibitor)。 抑制作用分为可逆性抑制与不可逆性抑制两类。 （一）不可逆性抑制作用（irreversible inhibition） 这类抑制剂通常以共价键与酶活性中心内的必需基团相结合，使酶失活，一般不能用透析、超滤等物理方法去除 。 （二）可逆性抑制作用(reversible inhibition) 这类抑制剂通常以非共价键与酶可逆性结合，使酶活性降低或丧失。采用透析或超滤的方法可将抑制剂除去，恢复酶活性。 按结合方式可分为： ①竞争性抑制作用（competitive inhibition） 抑制剂和底物的结构相似，能和酶的底物分子竞争与酶的活性中心相结合，从而阻碍酶与底物结合形成中间产物。 ①竞争性抑制作用 ②非竞争性抑制作用 (noncompetitive inhibition) 抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合，不影响酶与底物的结合，酶和底物的结合也不影响酶与抑制剂的结合。 ②非竞争性抑制作用 ③反竞争性抑制作用 (uncompetitive inhibition) ③反竞争性抑制作用 1、磺胺类抗菌药是典型的竞