生物技术在南瓜育种中应用.docVIP

生物技术在南瓜育种中应用摘要：从组织培养、基因克隆、分子标记等方面对生物技术在南瓜育种中的应用进行了综述，供中国南瓜科研工作者参考，并期望对提高国内南瓜遗传研究与育种利用水平有所帮助。 关键词：生物技术；南瓜；育种 南瓜为葫芦科（ Cucurbitaceae） 南瓜属（ Cucur bita ）中的1 年生草本植物， 起源于美洲大陆， 栽培种及野生近缘种共有27 个[1]。南瓜栽培种有5个， 而我国栽培的主要有3 个： 南瓜（ Cucur bita moschata D. ） 又名中国南瓜， 笋瓜（ C. maxima D. ） 又名印度南瓜， 西葫芦（ C. pepo L. ） 又名美洲南瓜[2]。南瓜在我国有悠久的栽培历史， 可作粮食、蔬菜、籽用、观赏和饲料等之用。南瓜还可以入药， 饮食须知、本草纲目等古籍对南瓜也有记载。随着科学技术的发展， 人们对南瓜又有了更深的了解， 南瓜含有丰富的维生素A、维生素C、胡萝卜素、糖类、淀粉、钙质等， 有很高的营养价值和较高的医疗保健作用[3]。 随着生产的发展，传统的育种技术已不能满足人们的需要，因此在南瓜育种中运用生物技术逐渐被大家所重视。作为一种高新技术， 生物技术是分子遗传学、生物化学、微生物学等基础学科发展的产物，在整个科学领域中占据了越来越显著的地位。作为世界新技术革命的重要组成部分， 生物技术已经成为人类彻底认识和改造自然界， 克服人类自身所面临的人口膨胀、粮食短缺、环境污染、疾病危害、能源资源匮乏等一系列重大问题的有效手段和工具[4]，下面笔者从几方面来论述。 1组织培养技术 1.1离体快繁和器官再生研究 器官离体再生是植物组织培养的重要内容，在黄瓜、西瓜、甜瓜、葫芦等作物上非常成功，但在南瓜方面则困难较大，进展一直缓慢。从目前的研究结果来看，影响南瓜离体快繁和器官再生的因素主要有以下几个方面： （1）就目前的情况看，大多数的南瓜均成功进行了组织培养和器官再生，只有少数没有成功，其原因估计与选用试材的基因有关。 （2）在组织培养和器官再生的过程中，培养基起关键作用。培养基的重点在配方上，一般来说是在现有的成熟培养基配方的基础上，添加一定量的激素，其中6-BA使用频率最高，诱导器官再生的有效范围在1.0～6.0 mg/L之间，在西葫芦离体培养的花上，KT1.0 mg/L为最优的激素配方[5]。含量在0.05～1.0 mg/L之间的IAA、NAA、IBA也有应用。 （3）外植体的苗龄和大小也影响着器官再生的频率。在南瓜中，刚转绿的南瓜子叶是诱导愈伤的最适外植体[6]。但对于西葫芦1片真叶期幼苗上的子叶为外植体最为适合[7]。笋瓜则是以4 d的子叶为最好[8]；赵建萍建立一套子叶高频率诱导再生芽的程序，为遗传转化研究打下了基础[8]。 （4）在组织培养中褐化是大家常遇到的现象，其对西葫芦的组织培养的影响很大，但有关的原因少见报道，其原因还要进一步研究下去。 1.2组织培养获得单倍体 单倍体在其他植物上的研究已经深入，但在南瓜上的研究报道很少，国外学者利用被射线辐照的花粉进行受精，获得了西葫芦的单倍体胚和植株。研究表明，γ射线的剂量、基因型、胚胎发育时期等因素对植株再生有着重要影响。25 Gy和50 Gy的γ-射线对孤雌生殖具有较好的诱导效应；虽然发育成各个时期的胚胎都能形成单倍体植株，但只有53.8%鱼雷胚和3.1%心型胚可以发育成单倍体植株，与其他葫芦科植物相比还处于很低的水平[9]。 胚胎挽救技术在许多作物上进行了成功的应用，是一条很有前途的育种途径。把南瓜与西葫芦的有性杂交后代进行培养，其中一个品种的南瓜杂种，没有培养成功，但另一个品种duda成功了，杂种后代表现可育，取得了成功的经验[10]，为南瓜育种开创了一条新的思路。 1.3细胞与原生质体培养 原生质体的培养与融合的研究在南瓜上较少。有学者采用电融合技术对黄瓜和黑籽南瓜的子叶原生质体进行了融合，并对电场条件进行了优化，得到了融合细胞的愈伤组织，但没能得到再生植株[11]，估计与材料的基因，培养基的配方，取材的时间、部位有关，可喜的是张兴国等开展了黄瓜与南瓜原生质体融合的研究，获得了体细胞杂种愈伤组织[12]，为南瓜育种引进新的育种资源。 2分子育种研究 2.1基因资源的研究 进行分子生物学研究首先要分析基因组的大小。对南瓜属11个种的材料的研究表明墨西哥南瓜种内差异较大，西葫芦较小。杂交后代的基因组大小与亲本具有明显差异，这有利于种间杂交后代的早期检测[13]。 2.2基因的克隆 基因的克隆是基因工程重要的组成部分，目前报道已克隆了抗冷性相关的基因―甘油-3-磷酸酰基转移酶基因，提高了黑子南瓜的抗