鲱精DNA 纤维水合状态的振动谱特征3.PDF

第 1 8 卷 , 第3 期 　　 　光 　谱 　学 　与 　光 　谱 　分 　析 Vol18 ,No 3 ,pp 30330 6 1 9 9 8 年 6 月 　　 　Spect ro scop y and Spect ral Analysis J une , 1998 　 鲱精 D NA 纤维水合状态的振动谱特征 余多慰 　　柯惟中 南京师范大学生物系 , 2 10097 　南京 摘 　要 　利用拉曼散射光谱测试技术 , 对不同温度处理后获得的各种相对湿度下的鲱精 DNA 纤 维进行脱氧核苷 C —H 振动与结合水 O —H 振动行为分析 , 以揭示其中结合水的数量特征 。结果 表明 , 运用 2 5926 ×I2964/ I 3024 新指标所获数据与文献报道的小牛胸腺 DNA 水合状态拉曼数据 不同 , 但与小牛胸腺 DNA 、鲑精 DNA 的红外 、X 射线衍射 、重量分析及差示扫描量热分析所得 数据相吻合 , 证明拉曼分析公式的修订是成功的。鲱精 DNA 纤维应与上述二种 DNA 纤维具有 同样的水合状态 , 每核苷酸对含有 9～14 个结合水分子 。 主题词 　鲱精脱氧核糖核酸 , 　激光拉曼光谱 , 　结合水 引　　言 　　鲱精 DNA 是分子生物学中常用的试剂 , 在人类染色体原位抑制杂交法中起关键作用 。由于它具有约 70 %的重复 DNA 序列 , 可用共同变性与复性的方法封阻基因组中高度重复序列区 , 借以提高分子探针对 ( ) 单拷贝基因杂交的特异性 。其熔点为 68 ℃, 较小牛胸腺 DNA 的熔点 72 ℃ 为低 。按 Van ′t Hoff 热焓计 ΔΗ [ 1 ] [2 ] ( ) 算 , 鲱精 DNA 的 变化规律与小牛胸腺 DNA 及鲑精 DNA 有较大差异 , Folk 等 用重量分析 B ET 法证明了鲑精 DNA 与小牛胸腺 DNA 的水合过程是一致的。 在 DNA 水合状态的拉曼研究方面 , 有关小牛胸腺 DNA 的报道较多[3 ,4 ] , 而鲱精 DNA 的数据尚属空 白。本文对鲱精 DNA2900～3000cm - 1 的脱氧核苷 C —H 伸缩振动区和 3000～3400cm - 1 的水分子 O —H 伸缩 振动区的表现特征进行了分析 , 认为使用磷酸脱氧核糖骨架中的 C —H 振动模 2960cm - 1 与 DNA 结合水 O —H 振动模 3200cm - 1 的峰强比 , 设置适宜常数值校正后 , 可以反映不同DNA 分子所具有的结合水数量 。 所得数据与小牛胸腺 DNA 的拉曼分析数据相比存在一定差异 , 但与小牛胸腺 DNA 的非拉曼分析数据 ( 红 ) [2 ,5～7 ] 外 、X 射线衍射 、重量分析等 及聚十二核苷拉曼数据 基本一致 , 本文就此提出对拉曼分析公式进 一步完善的看法 。 实 验 部 分 　　鲱精 DNA 购 自Fluka 公司 , 系纤维状态样品。将同一批号的四种纤维样品进行了不同温度的前处理 。 其中编号为 1 号与 2 号的纤维样品是置于开放式玻璃杯中 , 在普通电热隔水式培养箱中完成样品的前处理 过程 。3 号和 4 号纤维样品是置于封闭式铝盒中 , 在差示扫描量热仪 ( PE 公司 DSC7 型) 的程序升温控制 下完成前处理 。 经过前处理的纤维样品均置于开放式玻璃杯中 , 在拉曼光谱