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植物蛋白抽提试剂盒
产品说明书 / Specification Sheet
植物蛋白抽提试剂盒
产品编号:BSP053
产品简介:
本试剂盒在利用液氮充分磨碎植物组织的同时,采用特殊的试剂对植物细胞释放出来的蛋白进行沉淀,并使用
广谱蛋白酶抑制剂抑制蛋白酶活性,最大程度地保持所抽提蛋白质的完整性。而且最终的蛋白抽提物呈干粉状,有
利于蛋白质的长期稳定保存。提取的蛋白,包括膜蛋白,核蛋白,胞质蛋白以及在植物组织中含有的稀有蛋白在内
的全蛋白。分离得到的蛋白组分可应用于 SDS、Western blot等。每次可以提取 100mg 植物组织,本试剂盒
可以使用 50 次。
产品特点:
1. 提取的蛋白质是包括稀有蛋白在内植物细胞的全蛋白质。
2 . 可以进行 50x100mg 植物组织。
3 . 经过适当处理后,可以用于 2D 电泳,等电点聚焦等实验。
4 . 对植物细胞的裂解效果和植物细胞的非蛋白质成分去除效果高。
5 . 不需要超速度离心,可以同时处理多个样品。
运输和保存条件:
常温下运输,收到后将 Solution C 和 Solution D 在-20 度的条件下保存,Solution A 和 B 在 2-8 度的条件下保存,
保质期一年。
组成:
本试剂盒由 Solution A 和 Solution B 构成,可以使用 50 次。
1、 BSP053-1 Solution A 50 ml
2 、 BSP053-2 Solution B 100ml
3、 BSP053-3 Solution C 120ul
4 、 BSP053-4 Solution D 1ml
使用方法:
1、 实验前,将研钵和研槌置于-20 ℃冰箱中预冷;将植物组织置于-80℃冰箱中冷冻保存以备后用。
2 、 当植物组织仍处于冷冻状态时,用剪刀将植物组织剪碎。
3、 将剪碎的植物组织置于预冷的研钵中,加入液氮保持植物组织处于冷冻状态,用研槌尽快地将植物组织
研磨成粉末状。
4、 取大约 100mg 的组织粉末,加入 1ml Solution A 和 0.7ul Solution C 的,将粉末悬浮后,置于-20 ℃冰箱
中,静置45min。
5、 16000rpm,4 ℃,离心 15min,取沉淀。
6、 往沉淀中加入 1ml Solution B,10ul 的 Solution D 和 0.7ul Solution C ,并将沉淀重悬后,置于-20 ℃冰箱
中,静置1h。
7、 16000rpm,4 ℃,离心 15min,取沉淀。
8、 往沉淀中加入 1ml Solution B,10ul 的 Solution D 和 0.7ul Solution C 并将沉淀重悬后,立即 16000rpm,
离心 15min,取沉淀。
地址: 上海市松江区香闵路 698 号 Add: 698 Xiang Min Road SongJiang Shanghai China
电话/Tel: 86-21 传真/Fax: 86-21技术支持/Support: 800-820-1016
邮箱/Email: protein@ 网址/Web:
产品说明书 / Specification Sheet
9、 取沉淀进行冷冻干燥,-80℃保存。
10.根据下游实验的要求,选择合适的样品缓冲液对冷冻干燥的样品进行溶解,4℃ ,16000 RPM 离心 5min 。
11.取上清,-20℃保存,取适量体积用于各种实验。
注意事项:
1、 使用液氮时,请注意戴上防冻手套,避免液氮冻伤。若研磨的组织量较多,可多次加入液氮,保持植物
组织处于充分冷冻状态时研磨。
2 、 植物细胞壁的破碎程度会影响蛋白的抽提效果。故在步骤 3 中,尽量将植物组织充分研磨粉碎,以破碎
细胞壁,促进细胞蛋白的释放,同时尽量不要取植物的唯管组织。
3、 步骤 9 中冷冻的固体样品中含有或多或少的植物纤维,在加入适当的样品缓冲液对冷冻干燥固体溶解离
心后,会产生植物纤维沉淀,不影响下游实验。
4 、 用含有 SDS,尿素,SB3-
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