佛手散活血有效部位和其指纹图谱研究.pdfVIP

提 要 目的：通过对佛手散不同提取部位给药血清指纹图谱建立及其药效学的研 究，筛选佛手散活血有效部位。 方法：首先采用超临界C02 萃取(SFE)佛手散得SFE 部位，其药渣醇提后 经大孔吸附树脂柱分离为几个不同的醇洗脱部位(EE20 部位、EE40 部位、EE60 部位和EE95 部位) 。GC ／MS 测定 SFE 部位指纹图谱；HPLC 测定不同醇洗脱 部位的指纹图谱。将不同提取部位分别给小鼠灌胃，腹腔注射异丙肾上腺素(Iso) 致小鼠急性心肌缺血，测定动物给药前后心电图的S—T 段的偏移值，并取血测 定红细胞膜的流动性。将不同提取部位给新西兰大白兔灌胃后，不同时间点采集 血清，建立含药血清HPLC 指纹图谱，结合抗心肌缺血的药效学研究筛选出佛手 散中活血的有效部位。 结果：通过不同提取部位给药前后血清HPLC 指纹图谱的比较，发现EE20 组、EE40 组、EE60 组和 SFE 组给药血清与空白血清指纹图谱有差异，比较给 药前后血清HPLC 指纹图谱的欧氏距离的变化，可以发现EE20 组和EE40 组吸 收速度最快。通过不同提取部位抗心肌缺血的药效学研究发现，与模型对照组相 比，EE20 组和EE40 组的荧光偏振度P 降低，有显著性差异(P0 ．05，P0 ．01)， 对于S—T 段偏移值的影响，在5min 时EE20 组和SFE 组有显著性差异(P0 ．01， P0 ．05) ；在10min 时EE20 组有非常显著性差异(P0 ．01)，EE40 组和SFE 组 有显著性差异(P0 ．05) ；在20min 时EE20 组和SFE 组有显著性差异(P0 ．05， P0 ．01) 。 结论：EE20 组、EE40 组和SFE 组可拮抗Iso 引起的AS—T 段升高，可使 小鼠升高的AS—T 段明显降低，能够保护心肌细胞，起到抗急性心肌缺血的作 用，增加细胞的抗缺血缺氧能力；通过红细胞膜流动性实验发现，EE20 组、EE40 组也可代偿性增强膜的流动性，改善急性缺血期的能量代谢障碍的状态，防止心 肌的进一步坏死。对不同提取部位给药前后血清HPLC 指纹图谱研究，将有助于 快速发现中药的药效部位，使中药中活性成分的发现概率增加、周期缩短。 关键词 佛手散；活血有效部位；血清指纹图谱；HPLC ；GC ／MS Screening for Effective Part of Activating Blood Circulation in Fo-Shou Powder and HPLC Fingerprint of Rabbit Serum after Administration of Effective Part Speciality:Natural medicinal chemistry Author:Chen Ming-qiang Tutor:Professor Rong Rong Abstract Objective:By the establishing the serum fingerprint and pharmacodynamics research of the different extract parts in Fo-Shou Powder, screen for the effective parts which can activate the blood circulation. Methods:Fo-Shou Powder were extracted by supercritical C02 fluid and obtained the part of SFE, its dregs that extracted by alcohol were divided into several different parts of the alcohol-eluting(the parts of EE20, EE40, EE60, EE95). The