（ck）亚基及其同工酶.ppt

诊断酶学 诊断酶学的发展简史 1908年测尿AMY活力——诊断急性胰腺炎； 30年代ALP用于诊断骨骼疾病和肝脏疾病； 50年代用分光光度法建立连续监测酶活性方法使诊断酶学有了飞跃发展； 70年代初，逐步将注意力集中到同工酶测定上； 随着免疫学和技术方法的进展，用抗原抗体反应有可能直接测定微量的酶蛋白。 第一节 酶的概念与特征 一、酶的组成、结构和功能 （一）酶的本质与特性 由活细胞产生的可在细胞内外起催化作用的蛋白质。 （生物催化剂） Enzymes are proteins that have catalytic properties owing to their powers of specific activation of their substrates. 酶催化特点 高度的特异性 高催化效率 催化作用的可调节性 体外：浓硫酸，煮沸，20h以上 蛋白质 氨基酸 体内：pH7.4，37℃，1～2h （二）酶的结构与功能 单纯酶 结合酶 酶蛋白（apoenzyme） 辅因子（cofactor）辅酶（coenzyme） 辅基（prosthetic group） 二、酶的催化作用机制 （一）活化能 使作用物由一般状态转化为活化状态所需的能量称为活化能（activation energy）。 （二）酶降低活化能的作用机制 酶通过与底物形成一种或多种中间复合物来降低反应的活化能. 三、酶的命名、分类与编号 （一）酶的命名 1.习惯命名法 根据酶所催化的底物、反应的性质以及酶的来源等进行命名。例如：乳酸脱氢酶 2.系统命名法 即EC命名法，系统名称标明酶的底物与反应性质，底物名称之间以“：”分隔开。例如： L乳酸：NAD+氧化还原酶 （二）酶的分类与编号 1.氧化还原酶（oxido-reductases) 2.转移酶(transferases) 3.水解酶(hydrolases) 4.裂合酶或裂解酶(lyases) 5.异构酶(isomerases) 6.合成酶或连接酶(synthetases or ligases) ??? 4个数字分类酶编号 E、C、2，7，1，1 第二节 血清酶 一、血清酶的来源 （一）血浆特异酶：作为血浆蛋白的固有成分，在血浆中发挥特定的催化作用的酶类。如凝血酶原、LCAT等 有明确的生理功能； 含量高于其他组织。 （二）非血浆特异酶： 在血中不起任何生理作用； 浓度明显低于组织和细胞中含量。 1. 外分泌酶：血清中来源于外分泌腺的酶。 2.细胞酶：存在于机体各种组织细胞中进行物质代谢的酶类。如转氨酶、LD等 二、血清酶的去路 1.血清酶的半寿期 酶失活至原来活性一半时所需时间称为酶的半寿期（T1/2）。一般以血中酶的半寿期(half life)代表酶从血中清除快慢。 2.血清酶的失活和排泄 主要在血管内失活或分解。 三、血清酶变化的病理机制 （一）酶合成异常 对于血浆特异酶，酶合成下降是引起血中酶变化的重要因素。 1. 合成减少：肝功能损伤 2. 合成增多：恶性肿瘤 （二）酶释放增加 酶从损伤细胞中释放增加是疾病时大多数血清酶增高的主要机理。 主要原因： 缺氧 能量供应缺乏 缺血、炎症、坏死、肿瘤 细胞内外酶浓度的差异 酶蛋白分子量的大小 酶的组织分布 酶在细胞内定位与存在形式 （三）酶排出异常 肾功能减退时，血清AMY活性升高可能因酶排泄障碍而在血液中滞留所致。 胆道梗阻时，血清ALP升高的原因是梗阻区ALP合成加强，ALP排泄受阻而逆流入血。 四、血清酶的生理差异 性别 年龄 进食 运动 妊娠与分娩 其他 第四节、酶活性浓度的测定技术 一、酶活性浓度的测定 固定时间法 连续监测法 平衡法 1、固定时间法（两点法） 测定反应开始后某一时间内（t1到t2）产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。 特点：需加终止剂； 应做预试验确定线性时间； 比色计或分光光度计无需保温装置。 2、连续