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转录组Trinity组装软件介绍
转录组Trinity组装软件介绍;Outline;Why do we use Trinity ?;Why do we use Trinity ?;How does Trinity work ?;Inchworm
﹡构建k-mer库,K=25。
﹡从k-mer库中删除可能包含错误的k-mer。
﹡选择最高频度的k-mer作为种子(不包括复杂度和单一的k-mers,一次用完即从k-mer库中剔除),用来contig组装。
﹡延伸种子,k-1个overlap关系。(a greedy k-mer-based approach)
﹡延伸至不能再延伸,形成线性contig
﹡重复3-5,直到k-mer库为空。
;Chrysalis
﹡把可能存在可变剪切及其他平行基因的contigs聚类。
聚类情况:
(1)如果contigs间有k-1(25-1=24)个overlap。
(2)如果两个contig各有(k-1)/2个overlap。
﹡每个contigs集定义成一个component,对每个component构建de Bruijn graphs(构建de Bruijn 图时,Trinity利用k-1mer作为节点,SOAPdenovo利用k-mer作为节点)
﹡拿reads验证,看每个component的reads支持情况。;Butterfly
﹡graph simplification
(1)合并在de Bruijn 图中有连续节点的线性路径,以形成更长的序列。
(2)剔除可能由于测序错误(只有极少reads支持)的分叉,使边均匀。(多倍体多态性似乎比测序错误更常见,保留)
﹡plausible path scoring
用动态规划算法打分,鉴定被reads和read pairs支持的路径,剔除reads支持少的路径。
;Butterfly
;Butterfly
;How to run Trinity;具体执行步骤(2011-08-20版);产生文件(夹):
﹡ left.fa right.fa both.fa* inchworm.K25.L48.DS.fa meryl_kmer* meryl.kmers.min1.fa monitor.out chrysalis/ 及Trinity.fasta(为最终组装结果)
﹡Trinity最终组装成contig,不含N,而不是scaffold,组装的序列也无须补洞、优化。
﹡Trinity组装很占内存及空间,一般,2G以内包括2G?clean?data,4~15G内存足够;若clean?data大于2G?,内存要设大于15G,4G以上就要大于20G内存。;文件内容说明:
﹡ inchworm.K25.L48.DS.fa
;文件内容说明:
﹡Trinity.fasta
;
the end
thank you!
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