使用bodipy荧光染料快速测定微藻油脂含量方法 - 生物加工过程.pdf

第１１卷第６期 生　 物　 加　 工　 过　 程 Ｖｏｌ．１１Ｎｏ．６ ２０１３年１１月 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｎｏｖ． ２０１３ ｄｏｉ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－３６７８．２０１３．０６．０１４ 使用ＢＯＤＩＰＹ荧光染料快速测定微藻 油脂含量方法 １ １，２ １ ３ １，２ １ １ 刘亚男 ，姚长洪 ，周建男 ，孟迎迎 ，王海涛 ，曹旭鹏 ，薛　 松 （１． 中国科学院 大连化学物理研究所，大连 １１６０２３；２． 中国科学院大学，北京 １０００４９； ３．大连理工大学 生命科学与技术学院，大连 １１６０２４） 摘　 要：使用ＢＯＤＩＰＹ５０５／ ５１５ 荧光染料，通过荧光分光光度法测定藻细胞中的油脂含量。 结果表明：ＢＯＤＩＰＹ５０５／ ５１５ 的最佳染色条件为二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）体积分数２％，ＢＯＤＩＰＹ５０５／ ５１５ 最终质量浓度０２５ μｇ／ ｍＬ，染色时间３０ ２ ｍｉｎ，染色温度３５ ℃。 在最佳染色条件下，微藻油脂含量与荧光强度呈线性相关（Ｒ ＝０９７６４）。 通过测定 ＢＯＤＩＰＹ５０５／ ５１５ 染色的不同种属微藻的荧光强度，应用该关系计算其油脂含量，与质量法测定的结果相比没有显 著差异。 该方法较为普适，比传统方法相比具有简便快捷，试样用量少的特点，与尼罗红荧光染料相比具有较窄的 发射波谱范围，不会与微藻的自身荧光相互干扰，更适于过程监控及高含油藻株的筛选。 关键词：ＢＯＤＩＰＹ；荧光；油脂；微藻 中图分类号：Ｑ９４９　 　 　 　 文献标志码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１６７２－３６７８（２０１３）０６－００６８－０５ Ｒａｐｉｄ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｌｉｐｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｑｕａｎｔｉｆｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉｃｒｏａｌｇａｅ ｂａｓｅｄ ｏｎ ＢＯＤＩＰＹ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ １ １，２ １ ３ ＬＩＵ Ｙａｎａｎ ，ＹＡＯ Ｃｈａｎｇｈｏｎｇ ，ＺＨＯＵＪｉａｎｎａｎ ，ＭＥＮＧ Ｙｉｎｇｙｉｎｇ ， １，２ １ １ ＷＡＮＧ Ｈａｉｔａｏ ，ＣＡＯ Ｘｕｐｅｎｇ ，ＸＵＥ Ｓｏｎｇ （１．Ｄａｌｉａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｐｈｙｓｉｃｓ，Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｄａｌｉａｎ １１６０２３，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００４９，Ｃｈｉｎａ； ３．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｄａｌｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｄａｌｉａｎ １１６０２４，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｍｅｔｈｏｄｆｏｒ ｍｉｃｒｏａｌｇａｅ ｏｉｌ ｃｏｎｔｅｎｔ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ