含rgd多肽的重组丝蛋白的设计与合成.pdfVIP

含 RGD多肽的重组丝蛋白的设计与合成 王明启 ，吴娟红 。沈 凯，蔡玉荣，姚菊明 (浙江理工大学 先进纺织材料与制备技术教育部重点实验室 ，杭州I310018) 摘要 ：利用基 因工程方法将含短肽 RGD的氨基酸序列连接到桑蚕丝素蛋 巾，设计并合成了具有[TS(GAGAGS)GAGYT— GRGDSPAGYGAGvGAS 一级结构的重组桑蚕丝素一RGD融合蛋r1(简称 Silk—RGD)，利用 SDS—PAGE、红外光谱 、质谱和 热重分析等手段对所得产物进行 r分析 结果表明：重组融合蛋 白与所设计 的氨基酸序列一致 ，并且体现 出了天然桑蚕丝 蛋 白的结构与性能 南于重组蛋白含RGD序列预期具有 良好的细胞相容性 ．因此该融合蚩 白材料有望在生物医用材料 、组 织工程等领域得到应 。 关键词 ：基因工程 ：重组蛋 白；丝蛋 白；RGD 中图分类号 ：R554．3 文献标识码 ：A 文章编号 ：1001—7003(2009)02—0030—04 DesignandSynthesisofRecombinantSilkProteinContainingRGD Peptide WANG Ming—qi，WUJuan—hong，SHEN Kai，CAIYu-rong，YAO Ju-ming (TheKeyLaboratoryofAdvancedTextiLeMaterialsandManufaeturingTechnologyofMinistqy0fEducation． CollegeotMaterialsand．rextile，ZhejiangSet—TechUniversity，Hangzhou310018，China) Abstract：Anovelhybridprotein (Silk—RGD)whichcombinestheRGDtripeptideandprimaryaminoacidsequence derived from nativeBombyxmortsilkfibroinwasdesignedandsynthesizedbyusingthetransgenicEseheriehiacolt expression system．Theobtained protein wascharacterized byusing SDS—PAGE，FTIR．massspectrum and TG analyses．The data showed thattheamino acid sequence oftherecombinanthybrid protein agreedwellwith the designedone，andtheproteinshowedthesimilarstructureandpropertieswiththenativesilkfibroin．Sinceitcontains theRGD sequence，thishybridproteinisexpectedtobecellbioeotnpatibility，whichmaybeanidealcandidateforthe futureapplicationinbiomaterialandtissueengineeringfields． Keywords：Geneengineering；Recombinantprotein；Silkprotein；RGD 桑蚕丝素蛋白是一类结构性高分子材料 ．除了被 支架材料等的黏附是细胞生存与增殖所必需的．这种 用于传统的纺织原料外 ，在化妆品、食品、制药 、新材料 黏附主要通过一种被称作为黏合素的物质来介导的 等领域也不断得到开发和利用 丝索蛋 白由于其优越 黏合素分子在材料结合时所识别的只是材料中由数个 的力学性能和相对 良好的生物相容性 ．近年来以其为 氨基酸组成的短肽序列．其中最重要的识别序列是基 基材的各种细胞生长支架材料 的研究应运而生．成为 质或支架材料分子中的RGD(精氨酸一甘氨酸一天冬氨 组织工程中的一个热门研究领域 1-【3]桑蚕丝素蛋 白材