人可溶性4鄄1bbl 在毕氏酵母中的表达及其协同刺激效应的研究 .pdfVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 摇 圆园园猿 酝葬 ；员园（员）：员苑 耀圆园 悦澡蚤灶 允 悦葬灶糟藻 月蚤燥贼澡藻 ·员苑 · ［文章编号］摇 员园园苑鄄猿愿缘载（圆园园猿）园员鄄园园员苑鄄园源 人可溶性源鄄员月月蕴在毕氏酵母中的表达及其协同刺激效应的研究 员 员 圆 员 员 员 员 沈丽琴 ，徐摇 颖 ，黄伟达 ，邓忠彬 ，古摇 涛 ，马泓冰 ，张学光（员援 苏州大学生物技术研究所，江苏苏 州摇 圆员缘园园苑；圆援 上海复旦大学生化系，上海摇 圆园园源猿猿） ［ 摇 要］摇 目的：通过甲醇营养型毕氏酵母蛋白质表达系统，表达出具有生物活性的人可溶性源鄄员月月蕴重组蛋白。方法： 孕悦砸方法从载郧鄄源鄄员月月蕴转基因细胞中获得源鄄员月月蕴 的胞外段基因；利用酵母表达载体责孕陨悦在 粤 构建重组质粒 责孕陨悦在 粤鄄泽源鄄 α α 员月月蕴，经线性化后电转化导入毕氏酵母 郧杂员员缘 中，甲醇诱导表达；杂阅杂鄄孕粤郧耘 蛋白电泳和 宰藻泽贼藻灶 遭造燥贼 分析发酵上清中 澡泽源鄄 猿 员月月蕴蛋白表达水平及其特异性；体外栽细胞增殖试验（ 匀鄄栽凿砸掺入法）观察 澡泽源鄄员月月蕴 蛋白的生物学活性。结果：（员）成功 地扩增到源鄄员月月蕴 的胞外段基因，酶切鉴定及测序结果与已知的基因序列一致；（圆）杂阅杂鄄孕粤郧耘蛋白电泳和宰藻泽贼藻灶 遭造燥贼结果显 示所获重组蛋白的分子量与预期分子量（圆员噪阅）相同，并可被源鄄员月月蕴特异性抗体识别；（猿）重组蛋白在体外具有协同促进栽 细胞增殖的效应。结论：成功地在毕氏酵母表达系统中表达出具有生物学活性的人可溶性源鄄员月月蕴重组蛋白，为进一步研究 其功能奠定了物质基础。 ［关键词］摇 人可溶性源鄄员月月蕴；毕氏酵母；表达；协同效应 ［中图分类号］摇 砸猿怨圆援员摇 摇 摇 摇 ［文献标识码］摇 粤 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 砸藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 匀怎皂葬灶 杂燥造怎遭造藻 源鄄员月月蕴 蚤灶 再藻葬泽贼 孕蚤糟澡蚤葬 孕葬泽贼燥则蚤泽 葬灶凿 贼忆泽 悦燥泽贼蚤皂怎造葬贼蚤灶早 粤糟贼蚤增蚤贼赠 燥灶 栽 悦藻造造泽 员 员 圆 员 员 员 杂匀耘晕 蕴蚤鄄择蚤灶 ，载哉 再蚤灶早 ，匀哉粤晕郧 宰藻蚤鄄凿葬 ，阅耘晕郧 在澡燥灶早鄄遭蚤灶早 ，郧哉 栽葬燥 ，酝粤 匀燥灶早鄄遭蚤灶早 ，在匀粤晕郧载怎藻鄄 员 早怎葬灶早 （员 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠 燥枣 杂怎扎澡燥怎 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠，杂怎扎澡燥怎 圆员缘园园苑；圆 阅藻责葬则贼皂藻灶贼 燥枣 月蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠， 云怎凿葬灶 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠，杂澡葬灶早澡葬蚤圆园园源猿猿，悦澡蚤灶葬） ［粤遭泽贼则葬糟贼］摇 韵遭躁藻糟贼蚤增藻：酝藻贼澡赠造燥贼 燥责蚤糟 赠藻葬泽贼 责蚤糟澡蚤葬 责葬泽贼燥蚤泽 泽赠泽贼藻皂 憎葬泽 怎泽藻凿 贼燥 藻曾责 藻泽泽 藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 澡怎皂葬灶 泽燥造怎遭造藻 源鄄 员月月蕴 责 燥贼藻蚤灶 憎蚤贼澡 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠援 酝藻贼澡燥凿泽：粤糟糟燥凿蚤灶早 贼燥 贼澡藻 灶怎糟造藻葬 葬糟蚤凿 泽藻择怎藻灶糟藻 糟燥凿蚤灶早 澡怎皂葬灶 泽燥造怎遭造藻源鄄员月月蕴， 憎藻 糟造燥灶藻凿 贼澡藻 早藻灶藻泽憎蚤贼澡 孕悦砸 枣 燥皂 载郧鄄源鄄员月月蕴 贼 葬灶泽枣藻糟贼蚤燥灶 糟藻造造 造蚤灶藻，贼澡藻灶 贼澡藻 早藻灶藻 枣 葬早皂藻灶贼 枣燥 藻曾贼 葬糟藻造造葬 凿燥皂葬蚤灶 憎葬泽 泽怎遭糟造燥灶藻凿 蚤灶贼燥 贼澡藻 孕哉悦皂鄄栽 增藻糟贼燥 葬灶凿 泽藻择怎藻灶糟藻燥枣 泽源鄄员月月蕴糟阅晕粤憎葬泽糟燥灶枣蚤皂藻凿遭赠 泽藻择怎藻灶糟蚤灶早援 栽澡藻 泽源鄄员月月蕴早藻灶藻憎葬泽 蚤灶泽藻贼藻凿 蚤灶贼燥