第十二讲植物遗传转化.PDF

第十二讲 植物遗传转化 2012年秋季 上节课内容回顾 1）种质资源及种质保存的定义？ 种质资源（Germplasm Resource ）：又称遗传资源，习惯上 也叫品种资源。它包括栽培、野生及人工创造的粮食作物、 经济作物、园艺作物的品种或品系 种质保存（Germplasm Conservation ）：是指利用天然或人工 创造的适宜环境，保存种质资源，使个体中所含有的遗传物 质保持其完整性，有高的活力，能通过繁殖将其遗传特性传 递下去 2 ）什么是种质离体保存？有哪些方法？ 对离体培养的小植株、器官、组织、细胞或原生质体等材 料，采用限制、延缓或停止其生长的处理使之保存，在需要 时可重新恢复其生长，并再生植株的方法 有限制生长保存（低温、高渗透压、抑制剂、低氧分压、干 燥等保存法）及超低温保存 3 ）什么是超低温保存？主要程序有哪些？ 是指将植物的离体材料包括茎尖（芽）、分生组织、胚胎、 花粉、愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等，经过一定的方法 处理后在超低温（-196℃液氮）条件下进行保存的方法。 材料的准备—预处理—加入冷冻保护剂— 降温冷冻—种质液 氮保存—快速化冻（34-40 oC ）、洗涤、再培养 4 ）超低温保存的方法有哪些？ 常规超低温保存 玻璃化法超低温保存 包埋脱水法超低温保存 干燥冷冻法超低温保存 5 ）如何提高冷冻后细胞和组织的存活率？ 材料的选择 冷冻前的预处理 超低温保存方法的选择 材料的冷冻降温方法 冷冻及洗涤 再培养 抗冻蛋白 本讲主要内容 植物遗传转化的概念 方法 转基因植株的鉴定 转基因植物的安全性评价 一植物遗传转化的概念 植物遗传转化（Plant genetic transformation ）:是指将 外源基因转移到植物体内并稳定整合、表达并遗传， 从而使受体植物体现转移基因的特征的过程。又称为 基因转化（gene transformation ） 转基因植物（Transgenic plant ）:通过遗传转化手 段，获得目的基因(包括外源和内源基因两类) 并能 在后代中稳定遗传的植物 样品比较（左为普通棉花， 右为兔毛转基因棉花） 抗除草剂大豆 遗传转化获得再生植株的基本程序 目的基因的克隆 重组载体的构建：在体外进行DNA重组，将外源DNA 连接到能自我复制又带有选择标记的载体上 将重组载体转移入受体细胞 筛选出含有目的DNA 的受体细胞克隆 再生植株的获得 植物遗传转化的意义 转基因研究技术的中心环节即为DNA重组技术，其最终目的 是将DNA片段转入一个生物体，从而使该生物体表现某种性 状 转基因通过获取基因、重组基因和表达基因等过程来实现 转基因打破了物种的界限，使不同种的生物的遗传物质在分 子水平上重新组合在一起，并且完全可以按照人的意志或目 的，实现对生物体的改造 植物遗传转化技术的应用： 基础研究 植物性状改良 植物抗虫基因工程 抗病基因工程 植物抗逆基因工程 植物品质改良的基因工程 植物叶绿体基因工程 生物工程 植物生物反应器 二植物遗传转化的方法 基因枪法 电击转化法 PEG转化法 直接基因转移技术